Publicité
Vivalytic Bordetella
– Bruksanvisning
Reagens
Alla reagens som krävs för provbearbetningen är inkluderade i patronen.
Bearbetningen inkluderar cellysering, extraktion av nukleinsyra, DNA-ampli-
fiering och detektion.
Reagensen är PCR-kulor, bindningsbuffert, tvättbuffert och elueringsbuffert.
PCR-kulorna innehåller DNA-polymeras, primrar och prober. Bindningsbuf-
ferten möjliggör bindning av nukleinsyror under reningsprocessen. Tvättbuf-
ferten är en blandning av olika salter och lösningsmedel för borttagning av
föroreningar (t.ex. proteiner) under extraktionsprocessen. Elueringsbuffer-
ten är en buffert med låg salthalt som innehåller den renade nukleinsyran i
slutet av extraktionsprocessen.
Provtyper/medium
Testet är avsett för att detektera nukleinsyror i B. pertussis (gen-målsekvens
IS481), B. parapertussis (gen-målsekvens pIS1001) och B. holmesii (gen-
målsekvenser IS481, hIS1001) från nasofaryngeala pinnprover (böjlig
flockad pinne FLOQSwabs® 553C) i eNAT®-transportmedium (eNAT®-
transportmedium ref. 608C, COPAN Italia s.p.a.).
Samla in och förvara proverna enligt tillverkarens anvisningar [3].
Om provet inte bearbetas omedelbart efter provinsamling kan nukleinsyror
förvaras i eNAT®-transportmedium i upp till 4 veckor i rumstemperatur och
i 4 °C samt upp till 6 månader i –20 °C till –80 °C (se bruksanvisningen till
eNAT®-transportmedium [3]).
Provberedning
Använd en böjlig COPAN FLOQSwabs®-pinne för insamling av nasofarynge-
ala pinnprover. Överför varje pinne till 1 ml eNAT®-transportmedium. Bryt
av pinnen och förslut provröret. Skaka provröret som innehåller pinnprovet
och eNAT®-medium så att provet homogeniseras (undvik skumbildning). Fyll
300 μl av det homogeniserade provet i provinmatningen på patronen och
stäng patronlocket. Sätt in patronen i analysinstrumentet Vivalytic one.
Använd inte viskösa prover som är svåra att pipettera.
Testresultat
Efter automatisk bearbetning av provet med analysinstrumentet Vivalytic one
visas testresultatet på skärmen på analysinstrumentet Vivalytic one. Tiden
till resultat är cirka 50 minuter. För prover med hög titer är resultat tillgäng-
liga efter mindre än 33 minuter och testkörningen kan avslutas tidigare (se
kapitlet Avsluta testet).
Provet klassificeras som antingen positivt för B. pertussis, positivt för B. para-
pertussis, positivt för B. holmesii, negativt eller ogiltigt eller en kombination
av ovanstående. Vid en positiv detektion för ett eller flera av målen betraktas
testet som giltigt även om Human Control är negativ.
Detektion av den humana cellbaserade helprocesskontrollen (Human Con-
trol) i negativa prover visar att DNA-reningen och amplifieringsproceduren
lyckades och utesluter hämning av PCR-reaktionen. Tolkningen av resultat
visas i tabellen nedan.
46
Publicité
