Πρόσθετος απαιτούμενος εξοπλισμός και αναλώσιμα που απαιτούνται
αλλά δεν παρέχονται
• Αναλυτής Bosch Vivalytic one (αριθμός αναφοράς F09G300115)
• Συσκευή πιπέτας (100–1000 μl)
• Αποστειρωμένα ακροφύσια πιπέτας φίλτρου 100–1.000 µl
• Κιτ συλλογής επιχρίσματος με στειλεό:
Εύκαμπτος στειλεός με τριχίδια FLOQSwabs® 553C (COPAN Italia s.p.a.)
• Μέσο μεταφοράς:
eNAT® 608C (COPAN Italia s.p.a.)
• Κατάλληλη προστατευτική ενδυμασία
Αρχή της εξέτασης
Η εξέταση Vivalytic Bordetella είναι μια ποιοτική εξέταση βάσει PCR πραγμα-
τικού χρόνου.
Συνθήκες αποθήκευσης και χρήσης
Το προϊόν παραμένει σταθερό έως την ημερομηνία λήξης εφόσον αποθηκευτεί
σε θερμοκρασία +15 °C έως +25 °C. Οι συνθήκες αποθήκευσης και χρήσης
αναγράφονται στην κασέτα, στο σακουλάκι ή στην ετικέτα του κουτιού. Η
κασέτα πρέπει να χρησιμοποιηθεί σε θερμοκρασία +15 °C έως +25 °C, σχετική
υγρασία < 65%, εντός 15 λεπτών αφού ανοιχθεί το σακουλάκι. Με αυτόν τον
τρόπο διατηρείται η υγιεινή και αποφεύγεται η μείωση της απόδοσης λόγω
υγρασίας. Η παρατεταμένη έκθεση στην υγρασία επηρεάζει αρνητικά την
απόδοση της εξέτασης.
Αντιδραστήρια
Όλα τα αντιδραστήρια που είναι απαραίτητα για την επεξεργασία του δείγμα-
τος είναι ενσωματωμένα στην κασέτα. Η επεξεργασία περιλαμβάνει κυτταρική
λύση, εκχύλιση νουκλεϊκού οξέος, ενίσχυση και ανίχνευση DNA.
Τα αντιδραστήρια είναι σφαιρίδιο PCR, ρυθμιστικό διάλυμα δέσμευσης,
ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης και ρυθμιστικό διάλυμα έκλουσης. Το σφαιρίδιο
PCR περιέχει DNA πολυμεράση, εκκινητές και ανιχνευτές. Το ρυθμιστικό
διάλυμα δέσμευσης διευκολύνει τη δέσμευση των νουκλεϊκών οξέων κατά τη
διαδικασία καθαρισμού. Το ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης είναι ένα σκεύασμα
διαφόρων αλάτων και διαλυτών για την απομάκρυνση των ακαθαρσιών, π.χ.
πρωτεϊνών, κατά τη διαδικασία εκχύλισης. Το ρυθμιστικό διάλυμα έκλουσης
είναι ένα ρυθμιστικό διάλυμα χαμηλής συγκέντρωσης αλάτων και περιέχει τα
κεκαθαρμένα νουκλεϊκά οξέα στο τέλος της διαδικασίας εχκύλισης.
Τύπος δείγματος/Μέσο
Η εξέταση προορίζεται για την ανίχνευση νουκλεϊκών οξέων των B. pertussis
(αλληλουχία στοχευμένων γονιδίων IS481), B. parapertussis (αλληλουχία
στοχευμένων γονιδίων pIS1001) και B. holmesii (αλληλουχία στοχευμένων
γονιδίων IS481, hIS1001) σε ρινοφαρυγγικά επιχρίσματα (εύκαμπτος στειλεός
με τριχίδια FLOQSwabs® 553C) σε μέσο μεταφοράς eNAT® (μέσο μεταφοράς
eNAT® με κωδικό είδους 608C, COPAN Italia s.p.a.).
Συλλέγετε και φυλάσσετε τα δείγματα όπως υποδεικνύεται στις οδηγίες του
κατασκευαστή [3].
Σε περίπτωση που το δείγμα δεν υποβληθεί σε επεξεργασία αμέσως μετά τη
συλλογή του, τα νουκλεϊκά οξέα θα συντηρούνται μέσα σε μέσο μεταφοράς
eNAT® για έως 4 εβδομάδες σε θερμοκρασία δωματίου και στους 4 °C, καθώς
και για έως 6 μήνες στους –20 °C έως –80 °C (δείτε τις Οδηγίες χρήσης του
μέσου μεταφοράς eNAT® [3]).
Προετοιμασία δείγματος
Χρησιμοποιήστε έναν εύκαμπτο στειλεό COPAN FLOQSwabs® για τη συλλογή
των ρινοφαρυγγικών επιχρισμάτων. Κάθε στειλεός μεταφέρεται σε 1 ml μέσου
μεταφοράς eNAT®. Λυγίστε τον στειλεό και κλείστε το σωληνάριο. Ανακινή-
στε το δοκιμαστικό σωληνάριο που περιέχει το επίχρισμα σε μέσο eNAT®
για ομογενοποίηση (αποφύγετε τη δημιουργία αφρού). Προσθέστε 300 μl
ομογενοποιημένου δείγματος στην υποδοχή δείγματος της κασέτας και κλείστε
το καπάκι της κασέτας. Τοποθετήστε την κασέτα στον αναλυτή Vivalytic one.
Μη χρησιμοποιείτε παχύρρευστα δείγματα τα οποία είναι δύσκολα στην αναρ-
ρόφηση με πιπέτα.
Vivalytic Bordetella
144
– Οδηγίες χρήσης