Publicité
Vivalytic Bordetella
– Navodila za uporabo
Reagenti
Vsi reagenti, potrebni za obdelavo vzorcev, so integrirani v kartuši. Obdelava
obsega celično lizo, ekstrakcijo nukleinske kisline, pomnoževanje DNA in
detekcijo.
Reagenti so kroglica PCR, vezni pufer, pralni pufer in elucijski pufer. Kroglica
PCR vsebuje polimerazo DNK, primerje in sonde. Vezni pufer olajšuje vezavo
nukleinskih kislin med procesom čiščenja. Pralni pufer je formulacija iz
različnih soli in topil za odstranjevanje onesnaženj, npr. proteinov med pro-
cesom ekstrakcije. Elucijski pufer je pufer z nizko vsebnostjo soli in vsebuje
prečiščene nukleinske kisline na koncu procesa ekstrakcije.
Vrste vzorcev/medij
Test je namenjen odkrivanju nukleinskih kislin B. pertussis (ciljno zaporedje
genov IS481), B. parapertussis (ciljno zaporedje genov pIS1001) in B.
holmesii (ciljni zaporedji genov IS481, hIS1001) iz vzorcev brisov iz nosu
in žrela (fleksibilna palčka z najlonskimi vlakni FLOQSwabs® 553C) v
prenosnem mediju eNAT® (prenosni medij eNAT® ref. 608C, COPAN Italia
s.p.a.).
Vzorce zbirajte in shranjujte v skladu s proizvajalčevimi navodili za uporabo
[3].
Če vzorec ni obdelan takoj po odvzemu, bodo nukleinske kisline shranjene v
prenosnem mediju eNAT®, in sicer do štiri tedne pri sobni temperaturi in pri
4 °C in do šest mesecev pri temperaturi od –20 °C do –80 °C (glejte navodila
za uporabo prenosnega medija eNAT® [3]).
Priprava vzorcev
Uporabite fleksibilno palčko COPAN FLOQSwabs® za odvzem nazofaringe-
alnih vzorcev bolnikov. Vsak bris prenesite v 1 ml prenosnega medija eNAT®.
Palčko odlomite in epruveto zaprite. Epruveto z vzorcem brisa v mediju
eNAT® pretresite zaradi homogenizacije (izognite se penjenju). 300 μl
homogeniziranega vzorca dodajte v vhodno mesto za vzorce in zaprite pokrov
kartuše. Kartušo vstavite v analizator Vivalytic one.
Ne uporabljajte viskoznih vzorcev, ki jih je težko pipetirati.
Rezultati testa
Po samodejni obdelavi vzorca z analizatorjem Vivalytic one se rezultat testa
prikaže na zaslonu analizatorja Vivalytic one. Čas do pridobitve rezultata je
približno 50 minut. Rezultati vzorcev z visokim titrom so na voljo v manj kot
33 minutah, testni postopek pa je mogoče zaključiti prej (glejte razdelek
»Dokončanje testa«).
Vzorec se razvrsti kot B. pertussis pozitiven, B. parapertussis pozitiven, B. hol-
mesii pozitiven, negativen ali neveljaven ali kot kombinacija prej omenjenih.
V primeru pozitivnega odkritja ene od ciljnih bakterij ali več velja, da je test
veljaven, tudi če je kontrola Human Control negativna.
Odkrivanje človeške celice na podlagi kontrole celotnega procesa (Human
Control) v negativnih vzorcih prikazuje uspešno čiščenje DNK in postopek
pomnoževanja ter izključuje zaviranje reakcije PCR. Interpretacija rezultatov
je navedena v spodnji preglednici.
130
Publicité
