Publicité
Vivalytic Bordetella
– bruksanvisning
Reagenser
Alle reagenser som er nødvendige for prøvebehandlingen, er integrert i
kassetten. Behandlingen inkluderer cellelysering, ekstraksjon av nukleinsyre,
DNA-amplifisering og -påvisning.
Reagenser er PCR-kule, bindingsbuffer, vaskebuffer og elusjonsbuffer.
PCR-kulen inneholder DNA-polymerasen, -primerne og -probene. Bindings-
buffer letter bindingen av nukleinsyrer under renseprosessen. Vaskebuffer er
en formulering av forskjellige salter og løsningsmidler for å fjerne urenheter,
f.eks. proteiner, under ekstraksjonsprosessen. Elusjonsbuffer er en lavsalt-
buffer og inneholder de rensede nukleinsyrene på slutten av ekstraksjons-
prosessen.
Prøvetyper/medium
Testen er beregnet på å påvise nukleinsyrer fra B. pertussis (genmålsekvens
IS481), B. parapertussis (genmålsekvens pIS1001) og B. holmesii
(genmålsekvenser IS481, hIS1001) i nasofaryngeale vattpinneprøver
(fleksibel, flokket vattpinne FLOQSwabs® 553C) i eNAT®-transportmedium
(eNAT®-transportmedium ref. 608C, COPAN Italia s.p.a.).
Prøver skal tas og oppbevares slik det er angitt i produsentens instruksjoner
[3].
Dersom prøven ikke behandles umiddelbart etter prøvetaking, vil
nukleinsyrene bli bevart i eNAT®-transportmediet i opptil 4 uker ved
romtemperatur og ved 4 °C og opptil 6 måneder ved –20 °C til –80 °C (se
bruksanvisningen for eNAT® transportmedium [3]).
Prøveklargjøring
Bruk en COPAN FLOQSwabs® fleksibel vattpinne for innsamling av nasofa-
ryngeale vattpinneprøver. Hver vattpinne overføres til 1 ml eNAT®-transport-
medium. Knekk vattpinnen, og lukk røret. Rist prøverøret som inneholder
vattpinneprøven og eNAT®-medium, for homogenisering (unngå skumming).
Overfør 300 μl homogenisert prøve i prøveinntaket på kassetten, og lukk
kassettlokket. Sett kassetten inn i Vivalytic one-analysatoren.
Ikke bruk tyktflytende prøver som er vanskelige å pipettere.
Testresultat
Etter automatisk behandling av prøven med Vivalytic one-analysatoren
vises testresultatet på skjermen til Vivalytic one-analysatoren. Det tar cirka
50 minutter før resultatet er klart. Når det gjelder prøver med høye titre, er
resultater tilgjengelig etter mindre enn 33 minutter, og testkjøringen kan
avsluttes tidligere (se kapitlet om testavslutning).
Prøven klassifiseres enten som B. pertussis-positiv, B. parapertussis-positiv,
B. holmesii-positiv, negativ eller ugyldig, eller som en kombinasjon av de
ovennevnte. Ved positiv påvisning av ett eller flere av målene vurderes testen
som gyldig selv om Human Control er negativ.
Påvisning av human cellebasert full prosesskontroll (Human Control) i nega-
tive prøver viser en vellykket prosedyre for DNA-rensing og -amplifisering og
utelukker hemming av PCR-reaksjonen. Tolkning av resultatene står oppført
i tabellen nedenfor.
39
Publicité
