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Vivalytic Bordetella
– Instrucciones de uso
Condiciones de uso y almacenamiento
El producto es estable hasta la fecha de caducidad si se conserva a una
temperatura de entre +15 °C y +25 °C. Las condiciones de uso y almacena-
miento pueden consultarse en la etiqueta del cartucho, de la bolsa o de la
caja. El cartucho debe utilizarse a una temperatura que oscile entre +15 °C y
+25 °C, con una humedad relativa <65 % y en un plazo de 15 minutos a partir
de la apertura de la bolsa. De este modo se mantiene la higiene y se evita la
pérdida de rendimiento a causa de la humedad. La exposición prolongada
a la humedad impacta negativamente en el rendimiento de la prueba.
Reactivos
Todos los reactivos necesarios para el procesamiento de la muestra están
integrados en el cartucho. El procesamiento incluye lisis celular, extracción
de ácido nucleico, amplificación del ADN y detección.
Los reactivos son microesferas de PCR, tampón de unión, tampón de lavado
y tampón de elución. Las microesferas de PCR contienen ADN polimerasa,
cebadores y sondas. El tampón de unión facilita la fijación de los ácidos
nucleicos durante el proceso de purificación. El tampón de lavado es una
formulación de distintas sales y disolventes para eliminar las impurezas
(p. ej., las proteínas) durante el proceso de extracción. El tampón de elución
es un tampón de baja salinidad que contiene ácidos nucleicos purificados al
final del proceso de extracción.
Tipo de muestra/Medio
Esta prueba está indicada para la detección de ácidos nucleicos de
B. pertussis (secuencia de diana genética IS481), B. parapertussi
(secuencia de diana genética pIS1001) y B. holmesii (secuencias de dianas
genéticas IS481, hIS1001) en muestras de hisopos nasofaríngeos (hisopo
flocado flexible FLOQSwabs® 553C) en medio de transporte eNAT® (medio
de transporte eNAT® n.º de catálogo 608C, COPAN Italia s.p.a.).
Recoja y conserve las muestras tal y como se indica en las instrucciones del
fabricante [3].
En caso de que la muestra no se procese inmediatamente después de su
obtención, los ácidos nucleicos se conservarán en el medio de transporte
eNAT® hasta 4 semanas a temperatura ambiente y a 4 °C, y hasta 6 meses
a una temperatura comprendida entre –20 °C y –80 °C (consulte las
Instrucciones de uso del medio de transporte eNAT® [3]).
Preparación de la muestra
Utilice un hisopo COPAN FLOQSwabs® flexible para la recogida de muestras
de hisopo nasofaríngeas. Transfiera cada hisopo a 1 ml de medio de trans-
porte eNAT®. Rompa el hisopo y cierre el tubo. Agite el tubo de muestra que
contiene el hisopo de muestra en medio eNAT® para su homogenización
(evite la formación de espuma). Introduzca 300 μl de muestra homogenizada
en la entrada para muestra del cartucho y cierre la tapa del cartucho. Inserte
el cartucho en el analizador Vivalytic one.
No utilice muestras viscosas difíciles de pipetear.
Resultado de la prueba
Después del procesamiento automático de la muestra con el analizador
Vivalytic one, el resultado de la prueba se muestra en la pantalla del analiza-
dor Vivalytic one. El tiempo necesario para la obtención del resultado es de
unos 50 minutos. Los resultados de las muestras con título elevado están
disponibles en menos de 33 minutos, momento en que puede finalizarse la
prueba (consulte el capítulo Finalización de la prueba).
La muestra se clasifica como B. pertussis positiva, B. parapertussis positiva,
B. holmesii positiva, negativa o no válida, o como una combinación de las
anteriores. En el caso de la detección positiva de una o más de las dianas, la
prueba se considera válida incluso si el control Human Control es negativo.
La detección del control basado en células humanas para la totalidad del
proceso (Human Control) en muestras negativas indica un procedimiento
correcto de purificación y amplificación de ADN y descarta una inhibición
de la reacción PCR. La interpretación de los resultados se indica en la tabla
que figura a continuación.
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