Publicité
Vivalytic Bordetella
– Gebruiksaanwijzing
Opslag- en gebruiksvoorwaarden
Het product is stabiel tot de vervaldatum indien het wordt bewaard bij
+15 °C tot +25 °C. De opslag- en gebruiksvoorwaarden staan vermeld op
het etiket van de cassette, het zakje of de doos. De cassette moet worden
gebruikt bij +15 °C tot +25 °C, relatieve vochtigheid < 65%, binnen 15 min
na opening van het zakje. Zo wordt hygiëne gehandhaafd en prestatieverlies
door vochtigheid voorkomen. Langdurige blootstelling aan vochtigheid heeft
een negatieve invloed op de testprestaties.
Reagentia
Alle voor de monsterverwerking benodigde reagentia zijn in de cassette
geïntegreerd. De verwerking omvat cellyse, nucleïnezuurextractie, DNA-am-
plificatie en -detectie.
Reagentia zijn PCR-bead, bindingsbuffer, wasbuffer en elutiebuffer. De
PCR-bead bevat de DNA-polymerase, primers en probes. Bindingsbuffer
vergemakkelijkt de binding van nucleïnezuren tijdens het zuiveringsproces.
Wasbuffer is een formulering van verschillende zouten en oplosmiddelen
om onzuiverheden, zoals eiwitten, tijdens het extractieproces te verwijderen.
Elutiebuffer is een zoutarme buffer en bevat de gezuiverde nucleïnezuren
aan het einde van het extractieproces.
Monstertypes/medium
De test is bedoeld voor het detecteren van nucleïnezuren van B. pertussis
(gendoelsequentie IS481), B. parapertussis (gendoelsequentie pIS1001) en
B. holmesii (gendoelsequenties IS481, hIS1001) van nasofarynx-monsters
(FLOQSwabs® 553C, flexibel gevlokt) in eNAT®-transportmedium (eNAT®
transportmedium Ref. 608C, COPAN Italia s.p.a.).
Verzamel en bewaar monsters zoals aangegeven in de instructies van de
fabrikant [3].
Als het monster niet onmiddellijk na de monsterafname wordt verwerkt,
worden de nucleïnezuren in eNAT®-transportmedium maximaal 4 weken bij
kamertemperatuur en 4 °C en maximaal 6 maanden bij –20 °C tot –80 °C
bewaard (zie gebruiksaanwijzing van eNAT®-transportmedium [3]).
Monstervoorbereiding
Gebruik een COPAN FLOQSwabs® flexibel uitstrijkstaafje voor het verzame-
len van nasofarynxswabmonsters. Elk uitstrijkstaafje wordt overgebracht in
1 ml eNAT®-transportmedium. Breek het wattenstaafje en sluit het buisje.
Schud het monsterbuisje met het uitstrijkje in eNAT®-medium voor homoge-
nisatie (voorkom schuimvorming). Vul de monsterinvoer van de cassette met
300 μl gehomogeniseerd monster en sluit het deksel. Plaats de cassette in
de Vivalytic one-analysator.
Gebruik geen viskeuze monsters die moeilijk te pipetteren zijn.
Testresultaat
Na automatische verwerking van het monster met de Vivalytic one-analysa-
tor wordt het testresultaat op het scherm van de Vivalytic one-analysator
getoond. De tijd tot het resultaat is ongeveer 50 min. Voor specimens met
een hoge titer zijn de resultaten na minder dan 33 min beschikbaar en kan de
testrun eerder beëindigd worden (zie hoofdstuk Beëindiging van de test).
Het monster wordt geclassificeerd als B. pertussis positief, B. parapertussis
positief, B. holmesii positief, negatief of ongeldig of als een combinatie van
de bovengenoemde. Als een of meer targets positief worden gedetecteerd,
wordt de test als geldig beschouwd, zelfs als de Human Control negatief
was.
Detectie van de op de menselijke cel gebaseerde volledige procescontrole
(Human Control) in negatieve monsters toont een succesvolle DNA-purifi-
catie en amplificatieprocedure aan en sluit een remming van de PCR-reactie
uit. Interpretatie van resultaten wordt in de onderstaande tabel vermeld.
18
Publicité
