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e. Le processus se répète jusqu'à épuisement des réserves de réactifs.
5. Le RNA amplifié, appelé « amplicon », est prêt à être hybridé avec la sonde d'acide
nucléique marquée lors du test de protection de l'hybridation.
Test de protection de l'hybridation (HPA)
Lors du test de protection de l'hybridation (Hybridization Protection Assay, HPA),
l'amplicon s'hybride à des sondes d'acide nucléique simple brin qui sont marquées avec
une molécule d'ester d'acridinium (AE), les sondes hybridées sont ensuite sélectionnées
et détectées.
Figure 3. Test de protection de l'hybridation (Hybridization Protection Assay)
1. Le système déplace la MTU vers la station de chargement HPA. Le pipeteur distribue le
réactif-sonde dans chaque tubes et la station mélange le contenu des tubes.
Le réactif-sonde contient les oligonucléotides marqués avec l'AE. La séquence des
sondes complémente spécifiquement l'amplicon cible.
S'il est présent, l'amplicon s'hybride aux sondes.
2. La MTU se déplace vers l'incubateur à température élevée pour l'hybridation.
3. Une fois l'hybridation réalisée, la MTU se déplace vers la station de chargement HPA
pour l'ajout du réactif de sélection et le mélange.
4. La MTU revient à l'incubateur à température élevée pour le processus de sélection.
Pendant la phase de sélection, les sondes hybridées et non hybridées sont
différenciées en inactivant le marqueur AE sur les sondes non hybridées. Pendant la
détection, le signal chimiluminescent produit par la sonde hybridée est mesuré dans
Manuel de l'opérateur du Panther® / Panther Fusion® System
AW-20220-901 Rév. 001 (FR)
Vue d'ensemble
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