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e. La MTU se déplace vers l'incubateur de transition, où les complexes
oligonucléotide de capture/acide nucléique cible s'hybrident aux particules
(billes) magnétiques par les séquences de leurs queues.
f. La MTU est refroidie dans une rampe du refroidisseur et entre dans un
emplacement de stationnement où des aimants réalisent une première capture
des billes magnétiques de TCR sur les côtés de la paroi de la MTU.
2. Une fois que les billes de wTCR sont capturées, la MTU entre dans le module de la
station de lavage magnétique où la cible capturée est séparée des liquides résiduels.
Le lavage magnétique inclut un processus d'injection de solution de lavage, de
mélange, de capture de particules et d'aspiration de solution résiduelle pour éliminer
les résidus d'échantillon et de wTCR.
3. Le système de vide est utilisé pour l'aspiration, assurant une circulation optimale de
l'air et réduisant au minimum les aérosols. Après l'aspiration finale, de l'huile est
distribuée dans la MTU pour réduire au minimum l'évaporation pendant le reste de
l'exécution du test.
4. Lorsque le cycle de lavage magnétique est terminé, l'acide nucléique cible purifié est
prêt à être amplifié par Amplification médiée par la transcription.
Amplification médiée par la transcription (Transcription-Mediated Ampli-
fication, TMA)
L'amplification médiée par la transcription (Transcription-Mediated Amplification, TMA)
utilise deux enzymes, la transcriptase inverse et la polymérase du RNA pour produire des
milliards de copies de RNA cible amplifié à partir de l'acide nucléique cible purifié.
Le processus d'amplification dure une heure environ.
1. La MTU est transférée dans la station de chargement AMP où le réactif d'amplification
est pipeté dans chaque tube et mélangé.
2. La MTU est transférée de nouveau dans l'incubateur à température élevée pour l'étape
d'hybridation des amorces qui favorise la liaison des amorces à l'acide nucléique cible.
3. La MTU se déplace vers l'incubateur de transition pour être refroidi avant l'ajout du
réactif enzymatique.
4. La MTU se déplace vers la station de chargement AMP. Le pipeteur ajoute du réactif
enzymatique. La MTU est mélangée et transférée à l'incubateur AMP/RT pour
l'amplification à 42,7 °C.
a. La transcriptase inverse utilise les amorces pour créer une copie DNA du RNA
cible. Si la cible est le DNA, le processus passe à l'étape d.
b. Les activités RNase H de la transcriptase inverse dégradent le RNA cible initial.
c. La deuxième amorce se lie à la nouvelle copie DNA et la transcriptase inverse
crée un duplex DNA double brin.
d. La polymérase du RNA, par la transcription, produit de multiples copies RNA du
modèle DNA.
Manuel de l'opérateur du Panther® / Panther Fusion® System
AW-20220-901 Rév. 001 (FR)
Vue d'ensemble
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