Publicité
• W przypadkach granicznych może dojść do uzyskania atypowych charak-
terystyk reakcji PCR (np. płaska krzywa z niską lub wysoką wartością C
W przypadku atypowej charakterystyki nie można używać uzyskanych wy-
ników do interpretacji diagnostycznej. Oprogramowanie zaznacza wyniki
niejednoznaczne. Zaleca się powtórzenie badania.
• Test Vivalytic C. difficile jest to jakościowy test bazujący na reakcji PCR
w czasie rzeczywistym, który nie zapewnia wyniku ilościowego.
• Wynik dodatni nie musi oznaczać obecności żywych patogenów.
• Test wykrywa bakterie C. difficile będące nosicielami genów tcdA/tcdB,
ale nie rozróżnia szczepów wytwarzających toksyny i tych, które ich nie
wywarzają.
• Wynik ujemny nie wyklucza zakażenia bakterią C. difficile. Zaleca się, aby
próbki z wynikiem ujemnym były interpretowane z uwzględnieniem dodat-
kowych danych laboratoryjnych.
• Zbyt duża ilość stolca może wpływać hamująco na działanie testu.
Ocena wydajności analitycznej
Czułość analityczna (granica wykrywalności)
Granicę wykrywalności testu Vivalytic C. difficile określono jako najniższe
stężenie analitu, które może być wykrywane w spójny sposób (≥ 95% próbek
badanych w standardowych warunkach laboratoryjnych w przypadku stoso-
wania zdefiniowanego typu próbki).
Inkluzywność
Aby ocenić inkluzywność, przeprowadzono analizę in silico (zgodność
w narzędziu BLAST) sekwencji genomowej różnych stosownych szczepów
C. difficile w odniesieniu do sekwencji starterów PCR i sondy hydrolitycznej,
które są używane w teście Vivalytic C. difficile do amplifikacji i wykrywania
odpowiednich patogenów. Inkluzywność można wykazać dla szczepów, które
przedstawia Tabela 2.
Ekskluzywność / swoistość analityczna
Aby wykluczyć reaktywność krzyżową (ekskluzywność), przeprowadzono
analizę in silico (zgodność w narzędziu BLAST) regionu docelowego bakterii
C. difficile w odniesieniu do sekwencji genomowej różnych innych patogenów
reprezentujących powszechnie występujące patogeny żołądkowo-jelitowe
lub blisko spokrewnione gatunki. Nie potwierdzono obecności interferencji
(Tabela 3).
Odtwarzalność
Odtwarzalność testu Vivalytic C. difficile określono przy użyciu panelu
z 3 różnymi stężeniami bakterii C. difficile. W 3 ośrodkach badawczych każda
mieszanina została przetestowana na tym samym zestawie aparatów Vivalytic
przez tego samego operatora przy użyciu 3 serii, w 4 powtórzeniach, w ciągu
3 dni, co zapewniło łącznie 324 obserwacje na docelowy patogen. Odsetek
uzyskanych wyników dodatnich w zakresie różnych kombinacji skorelowano
z odsetkiem oczekiwanych wyników dodatnich (Tabela 4a).
Powtarzalność
Powtarzalność testu Vivalytic C. difficile określono przy użyciu panelu
z 1 stężeniem (3 × c95) bakterii C. difficile. W 1 ośrodku badawczym każda
mieszanina została przetestowana na tym samym zestawie aparatów Vivaly-
tic przez tego samego operatora przy użyciu 3 serii, w 20 powtórzeniach,
w ciągu 1 dnia, co zapewniło łącznie 60 obserwacji na docelowy patogen.
Odsetek uzyskanych wyników dodatnich w zakresie różnych kombinacji sko-
relowano z odsetkiem oczekiwanych wyników dodatnich (Tabela 4b).
Interferencje
Interferencje oceniono pod kątem substancji endogennych i egzogennych,
które potencjalnie mogą występować w próbce pacjenta. Tabela 5 przedsta-
wia substancje, które potencjalnie mogłyby interferować z testem.
Ocena wydajności klinicznej
Wyniki dotyczące czułości i swoistości uzyskano przy użyciu natywnych,
płynnych i miękkich próbek ludzkich stolców. Próbki pobrano w środowi-
sku klinicznym oraz porównano z wynikami uzyskanymi za pomocą metod
referencyjnych.
Vivalytic C. difficile
72
– instrukcja użytkowania
).
q
Publicité
