Publicité
време на процеса на пречистване. Промивният буфер представлява със-
тав на различни соли и разтворители за отстраняване на примеси, напр.
протеини, по време на процеса на екстракция. Елуиращият буфер е с
ниско съдържание на сол и съдържа пречистените нуклеинови киселини
в края на процеса на екстракция.
Типове проби/среда
Тестът е предназначен за употреба с проби от фекални натривки в среда
eNAT® (обикновен флокиран тампон FLOQSwabs® 552C, транспортна
среда eNAT® реф. 606C, COPAN Italia s.p.a.).
Взимайте и съхранявайте пробите, както е посочено в инструкциите на
производителя.
В случай че пробата не бъде обработена веднага след вземането ѝ,
нуклеиновите киселини ще бъдат запазени в транспортна среда eNAT®
до 4 седмици при стайна температура и при 4°C и до 6 месеца при темпе-
ратура от -20°C до -80°C (вижте Инструкции за употреба на транспортна
среда eNAT®
).
5
Подготовка на пробата
Използвайте обикновен флокиран тампон FLOQSwabs® (COPAN Italia
s.p.a.), за да съберете малко количество изпражнения, като поставите
върха на флокирания тампон в пробата с изпражнения и го завъртите.
Кървави, слузести или воднисти участъци от изпражненията трябва да
бъдат избрани и събрани. След вземането прегледайте тампона, за да
се уверите, че на върха му се вижда фекален материал. Ако това не е
така, поставете отново флокирания тампон в пробата от изпражнения
и го завъртете, като внимавате цялата площ на върха на тампона да е в
контакт с пробата. След събирането прехвърлете тампона в епруветка от
2 ml Copan eNAT® с транспортна среда eNAT®. Като задържате клечката
на тампона между палеца и показалеца, размачкайте и разбъркайте
пробата от изпражнения към стената на епруветката, за да диспергирате
равномерно и да суспендирате пробата в консервиращата среда. Дръжте
клечката на тампона близо до ръба на епруветката и я огънете под ъгъл от
180 градуса, за да я счупите на мястото на маркираната точка за счупва-
не. Изхвърлете счупената горна част на клечката на тампона и затегнете
капачката. Разклатете добре епруветката за проба, съдържаща пробата
от тампона и средата eNAT® (COPAN Italia s.p.a.), за хомогенизиране и
използвайте пипета, за да прехвърлите 300 μl хомогенизирана проба от
пациента във входа за пробата на касетата.
Не използвайте вискозни проби, които са трудни за пипетиране.
Резултат от теста
След автоматичната обработка на пробата с анализатора Vivalytic one
резултатът от теста се извежда на екрана на анализатора Vivalytic one. Вре-
мето за получаване на резултат е около 50 минути. За проби с висок титър
резултатите са налични след по-малко от 35 минути и тестовият цикъл
може да бъде прекратен по-рано (вижте глава „Прекратяване на теста").
Пробата се класифицира като положителна за C. difficile, отрицателна за
C. difficile или невалидна. В случай на положително откриване на C. difficile
тестът се счита за валиден дори ако Human Control е отрицателна.
Откриването на контрола на целия процес на базата на човешки клетки
(Human Control) в отрицателни проби показва успешна процедура на
екстракция и изключва инхибиране на PCR реакцията. Интерпретиране-
то на резултатите е показано в таблицата по-долу.
Human
C. difficile
(tcdA/tcdB)
Control
+
+/–
–
–
Препоръчва се повторно тестване.
1
Vivalytic C. difficile
Валидност
валиден
+
валиден
–
невалиден
– Инструкции за употреба
Резултат
Пробата се счита за положителна за C. difficile
(открит ген за токсин tcdA/tcdB).
Пробата се счита за отрицателна за C. difficile
(не е открит ген за токсин tcdA/tcdB)
Не може да се оцени.
1
112
Publicité
