Publicité
cesu oczyszczania. Bufor płuczący to połączenie różnych soli i rozpuszczalni-
ków, które mają usunąć nieczystości, np. białka, podczas procesu ekstrakcji.
Bufor do elucji to bufor o niskiej zawartości soli, który na końcu procesu
ekstrakcyjnego zawiera oczyszczone kwasy nukleinowe.
Rodzaje próbek / podłoże
Test jest przeznaczony do stosowania z próbkami wymazów stolca w podło-
żu eNAT® (standardowe wymazówki flokowane FLOQSwabs® 552C, podłoże
transportowe eNAT® nr kat. 606C, COPAN Italia s.p.a.).
Próbki należy pobierać i przechowywać w sposób opisany w instrukcjach
producenta.
W przypadku, gdy próbka nie zostanie przetworzona natychmiast po jej
pobraniu, kwasy nukleinowe zostaną zachowane w podłożu transportowym
eNAT® przez czas do 4 tygodni w temperaturze pokojowej i temperaturze
4°C oraz przez czas do 6 miesięcy w temperaturze od -20°C do -80°C (patrz
instrukcja użytkowania podłoża transportowego eNAT®
Przygotowanie próbek
Za pomocą standardowej wymazówki flokowanej FLOQSwabs® (COPAN Italia
s.p.a.) pobrać niewielką ilość stolca, wkładając do próbki stolca końcówkę flo-
kowanej wymazówki i nią obracając. Wybrać i pobrać należy krwawą, śluzowatą
lub wodnistą część stolca. Po pobraniu sprawdzić wymazówkę, aby upewnić
się, że na końcówce widoczny jest materiał kałowy. Jeśli go nie widać, włożyć
ponownie do próbki stolca flokowaną wymazówkę i obracać nią w taki sposób,
aby jej końcówka miała styczność z próbką. Po pobraniu umieścić wymazówkę
w probówce Copan eNAT® o pojemności 2 ml zawierającej podłoże transpor-
towe eNAT®. Przytrzymując trzonek wymazówki między kciukiem a palcem,
rozgnieść próbkę stolca o ściankę probówki i ją wymieszać, aby równomier-
nie rozprowadzić i zawiesić próbkę w podłożu konserwującym. Przytrzymać
trzonek wymazówki blisko krawędzi probówki i zgiąć go pod kątem 180 stopni,
aby ułamać w zaznaczonym punkcie przerwania. Wyrzucić złamaną górną
część trzonka wymazówki i zamknąć probówkę zatyczką. Potrząsać energicznie
probówką zawierającą próbkę wymazu i podłoże eNAT® (COPAN Italia S.P.A)
w celu uzyskania jednorodnej zawiesiny, a następnie za pomocą pipetora prze-
nieść 300 μl zhomogenizowanej próbki pacjenta do wejścia na próbki kasety.
Nie używać lepkich próbek, które trudno jest pipetować.
Wynik testu
Po automatycznym przetworzeniu próbki za pomocą analizatora Vivalytic one
wynik testu wyświetlany jest na ekranie analizatora Vivalytic one. Wynik jest
widoczny po około 50 minutach. W przypadku próbek o wysokim mianie
wyniki dostępne są po mniej niż 35 minutach, a przebieg testu może zostać
wcześniej zakończony (patrz część „Zakończenie testu").
Próbka zostanie sklasyfikowana jako dodatnia pod względem C. difficile,
ujemna pod względem C. difficile lub nieważna. W przypadku dodatniego
wykrycia bakterii C. difficile wynik testu jest uznawany za ważny, nawet jeśli
kontrola ludzka (Human Control) jest ujemna.
Wykrycie kontroli pełnego procesu na bazie komórek ludzkich (Human
Control) w ujemnych próbkach wskazuje na pomyślne przeprowadzenie pro-
cedury ekstrakcji i wyklucza hamowanie reakcji PCR. Interpretację wyników
przedstawiono w tabeli poniżej.
C. difficile
Human
(tcdA / tcdB)
Control
+
+/–
–
–
Zalecane jest ponowne wykonanie testu.
1
Vivalytic C. difficile
Ważność
ważny
+
ważny
–
nieważny
– instrukcja użytkowania
Wynik
Próbka jest uznawana za dodatnią pod względem
bakterii C. difficile (wykryto gen toksyny tcdA/tcdB).
Próbka jest uznawana za ujemną pod względem
bakterii C. difficile (wykryto gen toksyny tcdA/tcdB).
Nie podlega ocenie.
1
70
).
5
Publicité
