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nucleicos durante el proceso de purificación. El tampón de lavado es una
formulación de distintas sales y disolventes para eliminar las impurezas
(p. ej., las proteínas) durante el proceso de extracción. El tampón de elución
es un tampón de baja salinidad que contiene ácidos nucleicos purificados al
final del proceso de extracción.
Tipo de muestra/Medio
La prueba se ha diseñado para su uso con muestras de hisopos fecales en
medio eNAT® (hisopo flocado normal FLOQSwabs® 552C, medio de trans-
porte eNAT® Ref. 606C, COPAN Italia s.p.a.).
Recoja y conserve las muestras tal y como se indica en las instrucciones del
fabricante.
En caso de que la muestra no se procese inmediatamente después de su
obtención, los ácidos nucleicos se conservarán en el medio de transporte
eNAT® hasta 4 semanas a temperatura ambiente y a 4 °C, y hasta 6 meses a
una temperatura comprendida entre –20 °C y –80 °C (consulte las Instruc-
ciones de uso del medio de transporte eNAT®
Preparación de la muestra
Utilice un hisopo flocado normal FLOQSwabs® (COPAN Italia s.p.a.) para la
obtención de una pequeña cantidad de heces introduciendo la punta del hisopo
flocado en la muestra de heces y haciéndolo girar. Deberían seleccionarse
áreas sanguinolentas, viscosas o acuosas para realizar la obtención. Tras la ob-
tención, examine el hisopo para comprobar que en la punta haya material fecal
visible. Si no lo hay, vuelva a introducir el hisopo flocado en la muestra de heces
y hágalo girar procurando que la zona de la punta del hisopo esté en contacto
con la muestra. Tras la obtención, transfiera el hisopo al tubo Copan eNAT® de
2 ml con medio de transporte eNAT®. Sujete el eje del hisopo entre el pulgar
y el índice, y aplaste y mezcle la muestra de heces contra el lateral del tubo
para que la muestra se disperse y suspenda de manera uniforme en el medio
de conservación. Sujete el eje del hisopo cerca del borde del tubo, dóblelo en
un ángulo de 180 grados y rómpalo por el punto de corte marcado. Deseche la
parte superior rota del eje del hisopo y apriete la tapa. Agite el tubo de muestra
que contiene el hisopo de muestra y el medio eNAT® (COPAN Italia s.p.a.) para
su completa homogenización y utilice un pipeteador para introducir 300 μl de
muestra homogenizada del paciente en la entrada de muestra del cartucho.
No utilice muestras viscosas difíciles de pipetear.
Resultado de la prueba
Después del procesamiento automático de la muestra con el analizador
Vivalytic one, el resultado de la prueba se muestra en la pantalla del analiza-
dor Vivalytic one. El tiempo necesario para la obtención del resultado es de
unos 50 minutos. Los resultados de las muestras con título elevado están
disponibles en menos de 35 minutos, momento en que puede finalizarse la
prueba (consulte el capítulo Finalización de la prueba).
La muestra se clasifica como positiva para C. difficile, negativa para C. diffici-
le o no válida. En el caso de la detección positiva de C. difficile, la prueba se
considera válida incluso si el control Human Control es negativo.
La detección del control basado en células humanas (Human Control) para
la totalidad del proceso en muestras negativas indica un procedimiento de
extracción correcto y descarta una inhibición de la reacción PCR. La inter-
pretación de los resultados se indica en la tabla que figura a continuación.
C. difficile
Human
(tcdA/tcdB)
Control
+
+/–
–
+
–
–
Se recomienda la repetición de la prueba.
1
Vivalytic C. difficile – Instrucciones de uso
Validez
Resultado
La muestra se considera positiva para C. difficile
válida
(detección del gen de la toxina tcdA/tcdB).
La muestra se considera negativa para C. difficile
válida
(ausencia de detección del gen de la toxina tcdA/tcdB).
no válida
No evaluable.
125
).
5
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