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• En casos límite, pueden aparecer características de PCR atípicas (p. ej.,
curva plana con un valor C
atípicas, los resultados no pueden utilizarse para la interpretación del
diagnóstico. El software marca los resultados no concluyentes. En estos
casos, se recomienda repetir la prueba.
• Vivalytic C. difficile es una prueba cualitativa basada en la PCR a tiempo
real y no proporciona un resultado cuantitativo.
• Un resultado positivo no indica necesariamente que existan patógenos
viables.
• La prueba detecta la bacteria C. difficile portadora de los genes tcdA/
tcdB, pero no diferencia entre las cepas generadoras de toxinas y las que
no generan
• Un resultado negativo no excluye la infección por C. difficile. Se recomien-
da interpretar las muestras con resultado negativo en contexto con datos
de laboratorio adicionales.
• Una cantidad excesiva de heces puede tener efectos inhibidores en el
rendimiento del ensayo.
Evaluación del rendimiento analítico
Sensibilidad analítica (límite de detección)
El límite de detección de la prueba Vivalytic C. difficile se determinó con
la concentración más baja de analito que puede detectarse de manera
constante (≥ 95 % de muestras analizadas en condiciones rutinarias de
laboratorio con un tipo definido de muestra).
Inclusividad
Para evaluar la inclusividad, se realizó un análisis in silico (alineación
BLAST) de la secuencia genómica de diferentes cepas relevantes de C. di-
fficile con relación a la secuencia de los cebadores de PCR y la sonda de
hidrólisis utilizados en la prueba Vivalytic C. difficile para la amplificación y
detección de los patógenos respectivos. Se determinó la inclusividad para
las cepas incluidas en la tabla 2.
Exclusividad/Especificidad analítica
Para descartar la reactividad cruzada (exclusividad), se llevó a cabo un
análisis in silico (alineación BLAST) de la región diana de C. difficile en la
secuencia genómica de otros patógenos distintos representativos de patóge-
nos gastrointestinales comunes o de especies estrechamente relacionadas.
No hubo evidencia de interferencias (tabla 3).
Reproducibilidad
La reproducibilidad de la prueba Vivalytic C. difficile se estableció con un
panel de 3 concentraciones distintas de C. difficile. Un mismo operador,
en 3 centros de prueba, se encargó de analizar cada mezcla en el mismo
conjunto de instrumentos Vivalytic utilizando 3 LOTES en 4 réplicas durante
3 días, respectivamente, obteniendo así un total de 324 observaciones
por patógeno diana. Las tasas de positividad obtenidas para las distintas
combinaciones mostraron correlación con la tasa de positividad esperada
(tabla 4a).
Repetibilidad
La repetibilidad de la prueba Vivalytic C. difficile se estableció con un panel
de 1 concentración (3 × c95) de C. difficile. Un mismo operador, en 1 centro
de prueba, se encargó de analizar la mezcla en el mismo conjunto de instru-
mentos Vivalytic utilizando 3 LOTES en 20 réplicas durante 1 día, respectiva-
mente, obteniendo así un total de 60 observaciones por patógeno diana. Las
tasas de positividad obtenidas para las distintas combinaciones mostraron
correlación con la tasa de positividad esperada (tabla 4b).
Interferencias
Se evaluaron las interferencias causadas por sustancias endógenas y exó-
genas que podrían estar presentes en la muestra del paciente. Consulte la
tabla 5 para conocer las sustancias que pueden interferir con la prueba.
Vivalytic C. difficile – Instrucciones de uso
bajo o alto). Si se presentan características
q
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