Publicité
Αντιδραστήρια
Όλα τα αντιδραστήρια που είναι απαραίτητα για την επεξεργασία του δείγματος
είναι ενσωματωμένα στην κασέτα. Η επεξεργασία περιλαμβάνει κυτταρική
λύση, εκχύλιση νουκλεϊκού οξέος, ενίσχυση και ανίχνευση DNA.
Τα αντιδραστήρια είναι σφαιρίδιο PCR, ρυθμιστικό διάλυμα δέσμευσης,
ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης και ρυθμιστικό διάλυμα έκλουσης. Το σφαιρίδιο
PCR περιέχει DNA πολυμεράση, εκκινητές και ανιχνευτές. Το ρυθμιστικό
διάλυμα δέσμευσης διευκολύνει τη δέσμευση των νουκλεϊκών οξέων κατά τη
διαδικασία καθαρισμού. Το ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης είναι ένα σκεύασμα
διαφόρων αλάτων και διαλυτών για την απομάκρυνση των ακαθαρσιών, π.χ.
πρωτεϊνών, κατά τη διαδικασία εκχύλισης. Το ρυθμιστικό διάλυμα έκλουσης
είναι ένα ρυθμιστικό διάλυμα χαμηλής συγκέντρωσης αλάτων και περιέχει τα
κεκαθαρμένα νουκλεϊκά οξέα στο τέλος της διαδικασίας εχκύλισης.
Τύπος δείγματος/Μέσο
Η εξέταση προορίζεται για χρήση με δείγματα επιχρίσματος κοπράνων σε μέσο
eNAT® (Κανονικός στειλεός με τριχίδια FLOQSwabs® 552C, μέσο μεταφοράς
eNAT® Ref. 606C, COPAN Italia s.p.a.).
Συλλέγετε και φυλάσσετε τα δείγματα όπως υποδεικνύεται στις οδηγίες του
κατασκευαστή.
Σε περίπτωση που το δείγμα δεν υποβληθεί σε επεξεργασία αμέσως μετά τη
συλλογή του, τα νουκλεϊκά οξέα θα συντηρούνται μέσα σε μέσο μεταφοράς
eNAT® για έως 4 εβδομάδες σε θερμοκρασία δωματίου και στους 4 °C, καθώς
και για έως 6 μήνες στους -20 °C έως -80 °C (δείτε τις Οδηγίες χρήσης του
μέσου μεταφοράς eNAT®
Προετοιμασία δείγματος
Χρησιμοποιήστε Κανονικό στειλεό με τριχίδια FLOQSwabs® (COPAN Italia
s.p.a.) για να συλλέξετε μικρή ποσότητα κοπράνων εισάγοντας το άκρο
του στειλεού με τριχίδια μέσα στο δείγμα κοπράνων και περιστρέφοντάς
το. Οι περιοχές αιματηρών, γλοιωδών ή υδαρών κοπράνων θα πρέπει να
επιλέγονται και να συλλέγονται. Μετά τη συλλογή, εξετάστε τον στειλεό
για να βεβαιωθείτε ότι υπάρχει ορατό υλικό κοπράνων πάνω στο άκρο. Σε
διαφορετική περίπτωση, εισαγάγετε ξανά τον στειλεό με τριχίδια στο δείγμα
κοπράνων και περιστρέψτε τον προσέχοντας ώστε να έρθει σε επαφή με το
δείγμα όλη η περιοχή του άκρου του στειλεού. Μετά τη συλλογή, μεταφέρετε
τον στειλεό μέσα στο σωληνάριο Copan eNAT® 2 ml με μέσο μεταφοράς
eNAT®. Κρατήστε το στέλεχος του στειλεού ανάμεσα στον αντίχειρα και το
δάκτυλό σας, πολτοποιήστε και αναμίξτε το δείγμα κοπράνων στις πλευρές
του σωληναρίου ώστε να διασπαρεί ομοιόμορφα και να εναιωρηθεί το δείγμα
στο μέσο συντήρησης. Κρατήστε το στέλεχος του στειλεού κοντά στο χείλος
του σωληναρίου και λυγίστε το σε γωνία 180 μοιρών ώστε να το σπάσετε
στο επισημασμένο σημείο θραύσης. Απορρίψτε το σπασμένο επάνω μέρος
του στελέχους του στειλεού και σφίξτε το πώμα. Ανακινήστε σχολαστικά το
σωληνάριο δείγματος που περιέχει το επίχρισμα και το μέσο eNAT® (COPAN
Italia s.p.a.) ώστε να ομογενοποιηθεί και χρησιμοποιήστε συσκευή πιπέτας
ώστε να πληρώσετε με 300 μl ομογενοποιημένου δείγματος ασθενούς την
υποδοχή δείγματος της κασέτας.
Μη χρησιμοποιείτε παχύρρευστα δείγματα τα οποία είναι δύσκολα στην
αναρρόφηση με πιπέτα.
Αποτέλεσμα εξέτασης
Μετά την αυτόματη επεξεργασία του δείγματος με τον αναλυτή Vivalytic one,
το αποτέλεσμα της εξέτασης εμφανίζεται στην οθόνη του αναλυτή Vivalytic
one. Ο χρόνος έως την εμφάνιση του αποτελέσματος είναι περίπου 50 λεπτά.
Τα αποτελέσματα δειγμάτων υψηλής τιτλοποίησης είναι διαθέσιμα μετά από
λιγότερο από 35 λεπτά και η εξέταση μπορεί να τερματιστεί νωρίτερα (δείτε το
κεφάλαιο Τερματισμός εξέτασης).
Το δείγμα κατηγοριοποιείται είτε ως θετικό για C. difficile ή αρνητικό για C.
difficile είτε ως μη έγκυρο. Σε περίπτωση θετικής ανίχνευσης του C. difficile,
η εξέταση θεωρείται έγκυρη ακόμα και αν ο μάρτυρας Human Control είναι
αρνητικός.
Η ανίχνευση ολόκληρης της ποσότητας του μάρτυρα ελέγχου διεργασίας που
βασίζεται σε ανθρώπινα κύτταρα (Human Control) σε αρνητικά δείγματα
Vivalytic
).
5
118
C. difficile – Οδηγίες χρήσης
Publicité
