Publicité
• Un resultado positivo no indica necesariamente que existan patógenos
viables.
• Un resultado negativo no excluye la infección por norovirus. Se
recomienda interpretar las muestras con resultado negativo en contexto
con datos de laboratorio adicionales.
• Una cantidad excesiva de heces puede tener efectos inhibidores en el
rendimiento del ensayo.
Evaluación del rendimiento analítico
Sensibilidad analítica (límite de detección)
El límite de detección de la prueba Vivalytic Norovirus se determinó con la
concentración más baja de analito que puede detectarse de manera cons-
tante (≥ 95 % de muestras analizadas en condiciones rutinarias de laborato-
rio con un tipo definido de muestra) (tabla 1).
Inclusividad
Para evaluar la inclusividad, se realizó un análisis in silico (alineación BLAST)
de la secuencia genómica de diferentes norovirus relevantes con relación a
la secuencia de los cebadores de PCR y la sonda de hidrólisis utilizados en
la prueba Vivalytic Norovirus para la amplificación y detección de los patóge-
nos respectivos. Se determinó la inclusividad para las cepas incluidas en la
tabla 2.
Exclusividad/Especificidad analítica
Para descartar la reactividad cruzada (exclusividad), se llevó a cabo un análi-
sis in silico (alineación BLAST) de la región diana del norovirus en la secuen-
cia genómica de otros patógenos distintos representativos de patógenos gas-
trointestinales comunes o de especies estrechamente relacionadas. No hubo
evidencia de interferencias (tabla 3).
Reproducibilidad
La reproducibilidad de la prueba Vivalytic Norovirus se estableció con un pa-
nel de 3 concentraciones distintas del norovirus. En los 3 centros de prueba,
el mismo operador se encargó de analizar cada mezcla en el mismo conjunto
de instrumentos Vivalytic utilizando 3 lotes en 4 réplicas durante 3 días, res-
pectivamente. Las tasas de positividad obtenidas para las distintas combina-
ciones mostraron correlación con la tasa de positividad esperada (tabla 4a).
Repetibilidad
La repetibilidad de la prueba Vivalytic Norovirus se estableció con un panel
de 1 concentración (3 × c95) del norovirus. Un mismo operador, en 1 cen-
tro de prueba, se encargó de analizar la mezcla en el mismo conjunto de
instrumentos Vivalytic utilizando 3 LOTES en 20 réplicas, respectivamente,
obteniendo así un total de 60 observaciones por patógeno diana. Las tasas
de positividad obtenidas para las distintas combinaciones mostraron correla-
ción con la tasa de positividad esperada (tabla 4b).
Interferencias
Se evaluaron las interferencias causadas por sustancias endógenas y exó-
genas que podrían estar presentes en la muestra del paciente. Consulte la
tabla 5 para conocer las sustancias que pueden interferir con la prueba.
Evaluación del rendimiento clínico
Los resultados de sensibilidad y especificidad se derivaron de muestras de
heces humanas líquidas y blandas. Las muestras se recogieron en un entor-
no clínico y se compararon con los resultados obtenidos de los métodos de
referencia.
Las muestras para el análisis con los cartuchos Vivalytic Norovirus eran
muestras frescas para usar o congeladas para conservar y preparadas según
se ha descrito anteriormente en medio eNAT® (COPAN Italia S.p.A.).
Para el análisis de referencia, las muestras se prepararon según las reco-
mendaciones de los métodos de referencia utilizados. En total se analizaron
124 muestras. Las sensibilidad o concordancia de porcentaje de positivos
(CPP) se calculó como el 100 % × TP/(TP+FN). Las especificidad o concor-
dancia de porcentaje de negativos se calculó como el 100 % × TN/(TN + FP).
Los resultados de la evaluación del rendimiento clínico se muestran en la
tabla 6.
Vivalytic Norovirus
132
– Instrucciones de uso
Publicité
