Publicité
Реактиви
Всички реактиви, необходими за обработката на пробата, са вградени в
касетата. Обработката включва клетъчен лизис, екстракция на нуклеино-
ва киселина, амплификация и откриване на ДНК.
Реактивите са PCR перли, свързващ буфер, промивен буфер и елуиращ
буфер. PCR перлите съдържат ДНК полимераза, праймери и сонди.
Свързващият буфер улеснява свързването на нуклеинови киселини по
време на процеса на пречистване. Промивният буфер представлява със-
тав на различни соли и разтворители за отстраняване на примеси, напр.
протеини, по време на процеса на екстракция. Елуиращият буфер е с
ниско съдържание на сол и съдържа пречистените нуклеинови киселини
в края на процеса на екстракция.
Типове проби/среда
Тестът е предназначен за употреба с проби от фекални натривки в среда
eNAT® (обикновен флокиран тампон FLOQSwabs® 552C, транспортна
среда eNAT® реф. 606C, COPAN Italia s.p.a.).
Взимайте и съхранявайте пробите, както е посочено в инструкциите на
производителя.
В случай че пробата не бъде обработена веднага след вземането ѝ, нук-
леиновите киселини ще бъдат запазени в транспортна среда eNAT® до
4 седмици при стайна температура и при 4°C и до 6 месеца при темпера-
тура от –20 °C до –80 °C (вижте инструкции за употреба на транспортна
среда eNAT®
).
5
Подготовка на пробата
Използвайте обикновен флокиран тампон FLOQSwabs® (COPAN Italia
s.p.a.), за да съберете малко количество изпражнения, като поставите
върха на флокирания тампон в пробата с изпражнения и го завъртите.
Кървави, слузести или воднисти участъци от изпражненията трябва да
бъдат избрани и събрани. След вземането прегледайте тампона, за да
се уверите, че на върха му се вижда фекален материал. Ако това не е
така, поставете отново флокирания тампон в пробата от изпражнения
и го завъртете, като внимавате цялата площ на върха на тампона да е
в контакт с пробата. Уверете се че тампонът е покрит с изпражнения и
отстранете излишните чрез внимателно завъртане на тампона по пръс-
тена на пробата. След събирането прехвърлете тампона в епруветка от
2 ml Copan eNAT® с транспортна среда eNAT®. Като задържате клечката
на тампона между палеца и показалеца, размачкайте и разбъркайте
пробата от изпражнения към стената на епруветката, за да диспергирате
равномерно и да суспендирате пробата в консервиращата среда. Дръжте
клечката на тампона близо до ръба на епруветката и я огънете под ъгъл от
180 градуса, за да я счупите на мястото на маркираната точка за счупва-
не. Изхвърлете счупената горна част на клечката на тампона и затегнете
капачката. Разклатете добре епруветката за проба, съдържаща пробата
от тампона и средата eNAT® (COPAN Italia s.p.a.), обстойно поне 10 секун-
ди за хомогенизиране. Използвайте пипетор, за да прехвърлите 300 μl
хомогенизирана проба от пациента във входа за пробата на касетата.
Уверете се, че пипетирате само от супернатанта (горната част на проба-
та), за да предотвратите пренос на частици от изпражненията. В случай
на излишно количество частици в пробата се препоръчва да поставите
епруветката с пробата върху равна повърхност и да изчакате частиците
да се утаят за 5 минути.
Не използвайте вискозни проби, които са трудни за пипетиране.
Резултат от теста
След автоматичната обработка на пробата с анализатора Vivalytic one ре-
зултатът от теста се извежда на екрана на анализатора Vivalytic one. Вре-
мето за получаване на резултат е около 58 минути. За проби с висок титър
резултатите са налични след по-малко от 44 минути и тестовият цикъл
може да бъде прекратен по-рано (вижте глава „Прекратяване на теста").
Пробата се класифицира като положителна за норовирус, отрицателна за
норовирус или невалидна. В случай на положително откриване на норо-
вирус тестът се счита за валиден дори ако Human Control е отрицателна.
Vivalytic Norovirus
118
– инструкции за употреба
Publicité
