Publicité
Odczynniki stanowią: kulki do reakcji PCR, bufor wiążący, bufor płuczący
i bufor do elucji. Kulki do reakcji PCR zawierają polimerazę DNA, startery
i sondy. Bufor wiążący ułatwia wiązanie kwasów nukleinowych podczas pro-
cesu oczyszczania. Bufor płuczący to połączenie różnych soli i rozpuszczalni-
ków, które mają usunąć nieczystości, np. białka, podczas procesu ekstrakcji.
Bufor do elucji to bufor o niskiej zawartości soli, który na końcu procesu
ekstrakcyjnego zawiera oczyszczone kwasy nukleinowe.
Rodzaj próbki/nośnik
Test jest przeznaczony do stosowania z próbkami wymazów stolca w podło-
żu eNAT® (standardowe wymazówki flokowane FLOQSwabs® 552C, podłoże
transportowe eNAT® nr kat. 606C, COPAN Italia s.p.a.).
Próbki należy pobierać i przechowywać w sposób opisany w instrukcjach
producenta.
Jeśli próbka nie zostanie przetworzona natychmiast po pobraniu, kwasy
nukleinowe pozostaną zachowane w podłożu transportowym eNAT® przez
okres do 4 tygodni w temperaturze pokojowej i temperaturze 4°C oraz do
6 miesięcy w temperaturze od -20°C do -80°C (patrz instrukcja użytkowania
podłoża transportowego eNAT®
Przygotowanie próbek
Za pomocą standardowej wymazówki flokowanej FLOQSwabs® (COPAN Ita-
lia s.p.a.) pobrać niewielką ilość stolca, wkładając do próbki stolca końców-
kę flokowanej wymazówki i nią obracając. Wybrać i pobrać należy krwawą,
śluzowatą lub wodnistą część stolca. Po pobraniu sprawdzić wymazówkę,
aby upewnić się, że na końcówce widoczny jest materiał kałowy. Jeśli go
nie widać, włożyć ponownie do próbki stolca flokowaną wymazówkę i ob-
racać nią w taki sposób, aby jej końcówka miała styczność z próbką. Należy
upewnić się, że wymazówka jest tylko pokryta kałem i usunąć jego nadmiar,
delikatnie pocierając wymazówkę o krawędź próbki ruchem obrotowym. Po
pobraniu umieścić wymazówkę w probówce Copan eNAT® o pojemności
2 ml zawierającej podłoże transportowe eNAT®. Przytrzymując trzonek
wymazówki między kciukiem a palcem, rozgnieść próbkę stolca o ściankę
probówki i ją wymieszać, aby równomiernie rozprowadzić i zawiesić próbkę
w podłożu konserwującym. Przytrzymać trzonek wymazówki blisko krawędzi
probówki i zgiąć go pod kątem 180 stopni, aby ułamać w zaznaczonym punk-
cie przerwania. Wyrzucić złamaną górną część trzonka wymazówki i zamknąć
probówkę zatyczką. Dokładnie wstrząsać próbówką z wymazem i podłożem
eNAT® (COPAN Italia s.p.a.) przez co najmniej 10 sekund w celu homogeniza-
cji. Za pomocą pipetora przenieść 300 μl zhomogenizowanej próbki pacjenta
do wejścia na próbki w kasecie. Należy pipetować wyłącznie supernatant (w
górnej części próbki), aby zapobiec przenoszeniu cząstek kału. W przypadku
nadmiernej ilości cząstek w próbce zaleca się umieszczenie próbówki na pła-
skiej powierzchni na 5 minut, aby cząstki mogły osiąść na dnie probówki.
Nie używać lepkich próbek, które trudno jest pipetować.
Wynik testu
Po automatycznym przetworzeniu próbki za pomocą analizatora Vivalytic
one wynik testu wyświetlany jest na ekranie analizatora Vivalytic one. Wynik
jest widoczny po około 58 minutach. W przypadku próbek o wysokim mianie
wyniki dostępne są po mniej niż 44 minutach, a przebieg testu może zostać
wcześniej zakończony (patrz część „Zakończenie testu").
Próbka zostanie sklasyfikowana jako dodatnia pod względem norowirusa,
ujemna pod względem norowirusa lub nieważna. W przypadku dodatniego
wykrycia norowirusa wynik testu jest uznawany za ważny, nawet jeśli kontro-
la ludzka (Human Control) jest ujemna.
Wykrycie kontroli pełnego procesu na bazie komórek ludzkich (Human
Control) w ujemnych próbkach wskazuje na pomyślne przeprowadzenie pro-
cedury ekstrakcji i wyklucza hamowanie reakcji PCR. Interpretację wyników
przedstawiono w tabeli poniżej.
Test Vivalytic Norovirus
).
5
76
— instrukcja użytkowania
Publicité
