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Los reactivos son microesferas de PCR, tampón de unión, tampón de lavado
y tampón de elución. Las microesferas de PCR contienen ADN polimerasa,
cebadores y sondas. El tampón de unión facilita la fijación de los ácidos
nucleicos durante el proceso de purificación. El tampón de lavado es una
formulación de distintas sales y disolventes para eliminar las impurezas
(p. ej., las proteínas) durante el proceso de extracción. El tampón de elución
es un tampón de baja salinidad que contiene ácidos nucleicos purificados al
final del proceso de extracción.
Tipo de muestra/Medio
La prueba se ha diseñado para su uso con muestras de hisopos fecales en
medio eNAT® (hisopo flocado normal FLOQSwabs® 552C, medio de trans-
porte eNAT® Ref. 606C, COPAN Italia s.p.a.).
Recoja y conserve las muestras tal y como se indica en las instrucciones del
fabricante.
En caso de que la muestra no se procese inmediatamente después de su
obtención, los ácidos nucleicos se conservarán en el medio de transporte
eNAT® hasta 4 semanas a temperatura ambiente y a 4 °C, y hasta 6 meses a
una temperatura comprendida entre –20 °C y –80 °C (consulte las instruc-
ciones de uso del medio de transporte eNAT®
Preparación de la muestra
Utilice un hisopo flocado normal FLOQSwabs® (COPAN Italia s.p.a.) para
la obtención de una pequeña cantidad de heces introduciendo la punta del
hisopo flocado en la muestra de heces y haciéndolo girar. Deberían seleccio-
narse áreas sanguinolentas, viscosas o acuosas para realizar la obtención.
Tras la obtención, examine el hisopo para comprobar que en la punta haya
material fecal visible. Si no lo hay, vuelva a introducir el hisopo flocado en
la muestra de heces y hágalo girar procurando que la zona de la punta del
hisopo esté en contacto con la muestra. Asegúrese de que el hisopo quede
cubierto de heces y elimine el exceso de heces haciéndolo girar contra el
borde de la muestra. Tras la obtención, transfiera el hisopo al tubo Copan
eNAT® de 2 ml con medio de transporte eNAT®. Sujete el eje del hisopo entre
el pulgar y el índice, y aplaste y mezcle la muestra de heces contra el lateral
del tubo para que la muestra se disperse y suspenda de manera uniforme en
el medio de conservación. Sujete el eje del hisopo cerca del borde del tubo,
dóblelo en un ángulo de 180 grados y rómpalo por el punto de corte marca-
do. Deseche la parte superior rota del eje del hisopo y apriete la tapa. Agite
el tubo de muestra que contiene el hisopo de muestra y el medio eNAT®
(COPAN Italia s.p.a.) para su completa homogeneización durante al menos
10 segundos. Utilice un pipeteador para introducir 300 μl de muestra ho-
mogenizada del paciente en la entrada de muestra del cartucho. Asegúrese
de pipetear solamente el sobrenadante (parte superior de la muestra) para
evitar la contaminación cruzada de las partículas de heces. En caso de un
exceso de partículas en la muestra, se recomienda colocar el tubo de mues-
tra en una superficie plana y esperar a la sedimentación de las partículas
durante 5 minutos.
No utilice muestras viscosas difíciles de pipetear.
Resultado de la prueba
Después del procesamiento automático de la muestra con el analizador
Vivalytic one, el resultado de la prueba se muestra en la pantalla del analiza-
dor Vivalytic one. El tiempo necesario para la obtención del resultado es de
unos 58 minutos. Los resultados de las muestras con título elevado están
disponibles en menos de 44 minutos, momento en que puede finalizarse la
prueba (consulte el capítulo Finalización de la prueba).
La muestra se clasifica como positiva para norovirus, negativa para norovirus
o no válida. En el caso de la detección positiva de norovirus, la prueba se
considera válida incluso si el control Human Control es negativo.
La detección del control basado en células humanas (Human Control) para
la totalidad del proceso en muestras negativas indica un procedimiento de
extracción correcto y descarta una inhibición de la reacción PCR. La inter-
pretación de los resultados se indica en la tabla que figura a continuación.
Vivalytic Norovirus
).
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130
– Instrucciones de uso
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