Publicité
Αντιδραστήρια
Όλα τα αντιδραστήρια που είναι απαραίτητα για την επεξεργασία του δείγμα-
τος είναι ενσωματωμένα στην κασέτα. Η επεξεργασία περιλαμβάνει κυτταρική
λύση, εκχύλιση νουκλεϊκού οξέος, ενίσχυση και ανίχνευση DNA.
Τα αντιδραστήρια είναι σφαιρίδιο PCR, ρυθμιστικό διάλυμα δέσμευσης, ρυθ-
μιστικό διάλυμα πλύσης και ρυθμιστικό διάλυμα έκλουσης. Το σφαιρίδιο PCR
περιέχει DNA πολυμεράση, εκκινητές και ανιχνευτές. Το ρυθμιστικό διάλυμα
δέσμευσης διευκολύνει τη δέσμευση των νουκλεϊκών οξέων κατά τη διαδικα-
σία καθαρισμού. Το ρυθμιστικό διάλυμα πλύσης είναι ένα σκεύασμα διαφόρων
αλάτων και διαλυτών για την απομάκρυνση των ακαθαρσιών, π.χ. πρωτεϊνών,
κατά τη διαδικασία εκχύλισης. Το ρυθμιστικό διάλυμα έκλουσης είναι ένα ρυθ-
μιστικό διάλυμα χαμηλής συγκέντρωσης αλάτων και περιέχει τα κεκαθαρμένα
νουκλεϊκά οξέα στο τέλος της διαδικασίας εχκύλισης.
Τύπος δείγματος/Μέσο
Η εξέταση προορίζεται για χρήση με δείγματα επιχρίσματος κοπράνων σε μέσο
eNAT® (Κανονικός στειλεός με τριχίδια FLOQSwabs® 552C, μέσο μεταφοράς
eNAT® Ref. 606C, COPAN Italia s.p.a.).
Συλλέγετε και φυλάσσετε τα δείγματα όπως υποδεικνύεται στις οδηγίες του
κατασκευαστή.
Σε περίπτωση που το δείγμα δεν υποβληθεί σε επεξεργασία αμέσως μετά τη
συλλογή του, τα νουκλεϊκά οξέα θα συντηρούνται μέσα σε μέσο μεταφοράς
eNAT® για έως 4 εβδομάδες σε θερμοκρασία δωματίου και στους 4 °C, καθώς
και για έως 6 μήνες στους –20 °C έως –80 °C (δείτε τις Οδηγίες χρήσης του
μέσου μεταφοράς eNAT®
Προετοιμασία δείγματος
Χρησιμοποιήστε Κανονικό στειλεό με τριχίδια FLOQSwabs® (COPAN Italia
s.p.a.) για να συλλέξετε μικρή ποσότητα κοπράνων εισάγοντας το άκρο του
στειλεού με τριχίδια μέσα στο δείγμα κοπράνων και περιστρέφοντάς το. Οι
περιοχές αιματηρών, γλοιωδών ή υδαρών κοπράνων θα πρέπει να επιλέγονται
και να συλλέγονται. Μετά τη συλλογή, εξετάστε τον στειλεό για να βεβαιωθείτε
ότι υπάρχει ορατό υλικό κοπράνων πάνω στο άκρο. Σε διαφορετική περίπτωση,
εισαγάγετε ξανά τον στειλεό με τριχίδια στο δείγμα κοπράνων και περιστρέψτε
τον προσέχοντας ώστε να έρθει σε επαφή με το δείγμα όλη η περιοχή του
άκρου του στειλεού. Βεβαιωθείτε ότι ο στειλεός έχει καλυφθεί με κόπρανα και
αφαιρέστε την περίσσεια κοπράνων περιστρέφοντας με ήπιες κινήσεις έναντι
του χείλους του δείγματος. Μετά τη συλλογή, μεταφέρετε τον στειλεό μέσα
στο σωληνάριο Copan eNAT® 2 ml με μέσο μεταφοράς eNAT®. Κρατήστε το
στέλεχος του στειλεού ανάμεσα στον αντίχειρα και το δάκτυλό σας, πολτοποι-
ήστε και αναμίξτε το δείγμα κοπράνων στις πλευρές του σωληναρίου ώστε να
διασπαρεί ομοιόμορφα και να εναιωρηθεί το δείγμα στο μέσο συντήρησης.
Κρατήστε το στέλεχος του στειλεού κοντά στο χείλος του σωληναρίου και λυ-
γίστε το σε γωνία 180 μοιρών ώστε να το σπάσετε στο επισημασμένο σημείο
θραύσης. Απορρίψτε το σπασμένο επάνω μέρος του στελέχους του στειλεού
και σφίξτε το πώμα. Ανακινήστε σχολαστικά το σωληνάριο δείγματος που περι-
έχει το δείγμα επιχρίσματος και το μέσο eNAT® (COPAN Italia s.p.a.) για του-
λάχιστον 10 δευτερόλεπτα ώστε να ομογενοποιηθεί. Χρησιμοποιήστε συσκευή
πιπέτας ώστε να πληρώσετε με 300 μl ομογενοποιημένου δείγματος ασθενούς
την υποδοχή δείγματος της κασέτας. Βεβαιωθείτε ότι μεταφέρετε με πιπέτα
μόνο από το υπερκείμενο καλλιέργειας (επάνω μέρος του δείγματος) για την
πρόληψη επιμόλυνσης κατά τη μεταφορά σωματιδίων κοπράνων. Σε περίπτω-
ση περίσσειας ποσότητας σωματιδίων στο δείγμα, συνιστάται να τοποθετήσετε
το σωληνάριο δείγματος σε επίπεδη επιφάνεια και να αφήσετε τα σωματίδια να
καθιζήσουν για 5 λεπτά.
Μη χρησιμοποιείτε παχύρρευστα δείγματα τα οποία είναι δύσκολα στην αναρ-
ρόφηση με πιπέτα.
Αποτέλεσμα εξέτασης
Μετά την αυτόματη επεξεργασία του δείγματος με τον αναλυτή Vivalytic one,
το αποτέλεσμα της εξέτασης εμφανίζεται στην οθόνη του αναλυτή Vivalytic
one. Ο χρόνος έως την εμφάνιση του αποτελέσματος είναι περίπου 58 λεπτά.
Τα αποτελέσματα δειγμάτων υψηλής τιτλοποίησης είναι διαθέσιμα μετά από
λιγότερο από 44 λεπτά και η εξέταση μπορεί να τερματιστεί νωρίτερα (δείτε το
κεφάλαιο Τερματισμός εξέτασης).
Vivalytic Norovirus
).
5
124
– Οδηγίες χρήσης
Publicité
