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Die Kartusche enthält die Reagenzien PCR-Bead, Bindepuffer, Waschpuffer
und Elutionspuffer. Das PCR-Bead enthält die DNA-Polymerase sowie Primer
und Sonden. Der Bindepuffer erleichtert die Bindung von Nukleinsäuren
während des Aufreinigungsprozesses. Der Waschpuffer ist eine Formulie-
rung aus verschiedenen Salzen und Lösungsmitteln, um Verunreinigungen
wie z. B. Proteine während des Extraktionsprozesses zu entfernen. Der Eluti-
onspuffer ist ein salzarmer Puffer und enthält die aufgereinigten Nukleinsäu-
ren am Ende des Extraktionsprozesses.
Probentypen/-medium
Der Test ist zur Verwendung mit Stuhlabstrichproben in eNAT® Medium (re-
guläre beflockte Tupfer FLOQSwabs® 552C, eNAT® Transportmedium 606C,
COPAN Italia S.p.A.) vorgesehen.
Die Proben sind gemäß Herstelleranleitung zu entnehmen und zu lagern.
Falls die Probe nicht sofort nach der Entnahme analysiert wird, sind die
Nukleinsäuren in eNAT® Transportmedium bei Raumtemperatur und bei 4 °C
bis zu 4 Wochen bzw. bei –20 °C bis –80 °C bis zu 6 Monate haltbar (siehe
Gebrauchsanweisung des eNAT® Transportmediums
Probenvorbereitung
Nehmen Sie mit einem regulären beflockten Tupfer (FLOQSwabs®, COPAN
Italia S.p.A.) eine kleine Menge Stuhl auf, indem Sie die Spitze des beflock-
ten Tupfers in die Stuhlprobe eintauchen und drehen. Es sollten gezielt blu-
tige, schleimige oder wässrige Bereiche der Stuhlprobe ausgewählt und auf-
genommen werden. Vergewissern Sie sich nach der Probengewinnung, dass
an der Tupferspitze Stuhlprobenmaterial sichtbar ist. Ist dies nicht der Fall,
tauchen Sie den beflockten Tupfer erneut in die Stuhlprobe ein und drehen
Sie ihn. Achten Sie darauf, dass alle Bereiche der Tupferspitze mit der Probe
in Kontakt kommen. Stellen Sie sicher, dass der Tupfer nur mit einer dünnen
Stuhlschicht bedeckt ist und entfernen Sie überschüssigen Stuhl durch vor-
sichtiges Drehen des Tupfers gegen den Rand des Probenröhrchens. Geben
Sie den Tupfer nach der Probengewinnung in das Copan eNAT® 2-ml-Röhr-
chen mit eNAT® Transportmedium. Halten Sie den Stiel des Tupfers zwi-
schen Daumen und Zeigefinger und drücken Sie den Tupfer in drehenden
Bewegungen gegen die Röhrchenwand, sodass die Stuhlprobe gleichmäßig
im Konservierungsmedium verteilt und gelöst wird. Halten Sie den Stiel
des Tupfers nahe am Röhrchenrand fest, biegen Sie ihn um 180 Grad und
brechen Sie ihn an der markierten Bruchstelle ab. Entsorgen Sie den abge-
brochenen oberen Teil des Tupfers und verschließen Sie das Röhrchen mit
dem Deckel. Schütteln Sie das Probenröhrchen mit der Abstrichprobe und
dem eNAT® Medium (COPAN Italia s.p.a.) mindestens 10 Sekunden lang
gründlich, um die Probe zu homogenisieren. Geben Sie 300 μl der homoge-
nisierten Patientenprobe mit einem Pipettor in die Probeneingabe der Kar-
tusche. Achten Sie darauf, nur aus dem Überstand (oberer Teil der Probe) zu
pipettieren, um eine Verschleppung von Stuhlpartikeln zu vermeiden. Bei zu
vielen Partikeln in der Probe empfiehlt es sich, das Probenröhrchen auf eine
ebene Oberfläche zu stellen und die Partikel 5 Minuten lang sedimentieren
zu lassen.
Nutzen Sie keine viskosen Proben, die schwierig zu pipettieren sind.
Testergebnis
Nach der automatischen Verarbeitung der Probe mit dem Vivalytic one Ana-
lyser wird das Testergebnis auf dem Bildschirm des Vivalytic one Analysers
angezeigt. Das Ergebnis wird nach ca. 58 Minuten angezeigt. Bei Proben mit
hohem Titer liegen die Ergebnisse nach weniger als 44 Minuten vor und der
Testlauf kann vorzeitig beendet werden (siehe Abschnitt „Beendigung des
Tests").
Die Probe wird entweder als Norovirus-positiv, Norovirus-negativ oder un-
gültig klassifiziert. Bei einem positiven Norovirus-Nachweis wird der Test als
valide gewertet, selbst wenn die Human Control negativ ist.
Die Detektion der humanzellbasierten Gesamtprozesskontrolle (Human
Control) in negativen Proben zeigt eine erfolgreiche Extraktion an und
schließt eine Inhibierung der PCR-Reaktion aus. Die Interpretation der Er-
gebnisse ist in der folgenden Tabelle zusammengefasst.
Vivalytic Norovirus
10
– Gebrauchsanweisung
).
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