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I reagenti sono sfera PCR, tampone legante e tamponi di lavaggio e soluzio-
ne. La sfera PCR contiene la DNA polimerasi, i primer e le sonde. Il tampone
legante semplifica il legame degli acidi nucleici durante il processo di purifi-
cazione. Il tampone di lavaggio comprende una formulazione di sali e solven-
ti diversi per rimuovere le impurità, ad es. le proteine durante il processo di
estrazione. Il tampone di soluzione ha un basso tenore di sale e contiene gli
acidi nucleici depurati alla fine del processo di estrazione.
Tipi di campione/Liquido di trasporto
Il test è destinato all'uso con campioni di tamponi di feci in terreno eNAT®
(tamponi floccati standard FLOQSwabs® 552C, terreno di trasporto eNAT®
Ref. 606C, COPAN Italia s.p.a.).
Raccogliere e conservare i campioni come indicato nelle istruzioni del pro-
duttore.
Se il campione non viene processato immediatamente dopo il prelievo, gli
acidi nucleici si conservano nel terreno di trasporto eNAT® fino a 4 settimane
a temperatura ambiente e a 4 °C e fino a 6 mesi a una temperatura compresa
tra -20°C e -80°C (vedere le istruzioni d'uso del terreno di trasporto eNAT®
Preparazione del campione
Utilizzare un tampone floccato standard FLOQSwabs® (COPAN Italia s.p.a.)
per raccogliere una piccola quantità di feci inserendo la punta del tampone
floccato nel campione di feci e ruotandolo. È necessario selezionare e racco-
gliere le aree sanguinolente, viscide o acquose delle feci. Dopo la raccolta,
esaminare il tampone per assicurarsi che il materiale fecale sia visibile sulla
punta. In caso contrario, inserire nuovamente il tampone floccato nel cam-
pione di feci e ruotare facendo attenzione che tutta l'area della punta del
tampone venga a contatto con il campione. Assicurarsi che il tampone sia
appena coperto dalle feci e rimuovere le feci in eccesso ruotando delicata-
mente il tampone contro il bordo del campione. Dopo il prelievo, trasferire
il tampone nella provetta Copan eNAT® da 2 ml con il terreno di trasporto
eNAT®. Tenendo l'asta del tampone tra pollice e l'indice, schiacciare e
mescolare il campione di feci contro il lato della provetta per disperdere
e sospendere uniformemente il campione nel terreno di conservazione.
Tenere l'asta del tampone vicino al bordo della provetta, piegarla formando
un angolo di 180 gradi per romperla nel punto di rottura segnato. Gettare
la parte superiore rotta del tampone e chiudere il tappo. Agitare la provetta
contenente il campione del tampone e il terreno eNAT® (COPAN Italia s.p.a.)
con attenzione per almeno 10 secondi per consentire l'omogeneizzazione.
Utilizzare un pipettatore per introdurre 300 μl di campione paziente omoge-
neizzato nell'ingresso per campione della cartuccia. Assicurarsi di prelevare
solo il surnatante (parte superiore del campione) per evitare il trasporto di
particelle di feci. In caso di eccesso di particelle nel campione, si raccoman-
da di posizionare la provetta su una superficie piana e di lasciare sedimenta-
re le particelle per 5 minuti.
Non utilizzare campioni viscosi perché sono difficili da inserire nella provetta.
Risultato del test
Dopo l'elaborazione automatica del campione effettuata con l'analizzatore
Vivalytic one, il risultato del test viene visualizzato sullo schermo dell'analiz-
zatore Vivalytic one. Il tempo al risultato è di circa 58 minuti. Per i campioni
ad alto titolo, i risultati sono disponibili entro 44 minuti, dopo i quali è possi-
bile concludere il ciclo di test (vedere il capitolo Fine del test).
Il campione viene classificato come positivo per norovirus, negativo per
norovirus o non valido. In caso di rilevamento positivo del norovirus, il test è
considerato valido anche se Human Control è negativo.
Il rilevamento della cella umana sulla base del processo di controllo (Hu-
man Control) nei campioni negativi evidenzia che la procedura di estrazione
è stata corretta ed esclude l'inibizione della reazione PCR. L'interpretazione
dei risultati è illustrata nella tabella riportata di seguito.
Vivalytic Norovirus
28
- Istruzioni d'uso
).
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