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Réactifs
Tous les réactifs nécessaires au traitement des échantillons sont intégrés dans
la cartouche. Le processus comprend la lyse cellulaire, l'extraction d'acide nu-
cléique, l'amplification et la détection d'ADN.
Les réactifs sont la bille PCR, le tampon de liaison, le tampon de lavage et
le tampon d'élution. La bille PCR contient l'ADN polymérase, les amorces et
les sondes. Le tampon de liaison permet de faciliter la liaison des acides nu-
cléiques au cours du processus de purification. Le tampon de lavage est une
formulation de différents sels et solvants permettant d'éliminer les impuretés,
notamment les protéines au cours du processus d'extraction. Le tampon d'élu-
tion est un tampon à faible teneur en sel contenant les acides nucléiques puri-
fiés au terme du processus d'extraction.
Type/milieu dʼéchantillon
Le test est destiné à être utilisé avec un écouvillon humain bilatéral combiné de
l'aisselle, de l'aine et du nez ou avec des écouvillons nasaux en milieu liquide
Amies (Copan Liquid Amies Elution Swab (eSwab®) Collection and Transport
System, réf. 480CE, COPAN Italia s.p.a.).
Prélevez et stockez les échantillons comme indiqué dans les instructions du
fabricant.
Si l'échantillon n'est pas traité immédiatement après le prélèvement d'échantil-
lon, les acides nucléiques seront conservés dans le milieu de transport d'Amies
liquide jusqu'à 5 jours à température ambiante, 7 jours à 4 °C et jusqu'à 6 mois
à –20 °C (voir le manuel de l'utilisateur de l'eSwab®
Préparation des échantillons
Utilisez deux écouvillons floqués ordinaires (FLOQSwabs® COPAN Italia
s.p.a.) pour prélever séparément des échantillons humains dans 1 mL
d'Amies liquide. Le premier écouvillon est utilisé pour l'échantillon bilatéral
de l'aisselle et de l'aine et le second pour l'échantillon nasal.
Description de la procédure de prélèvement d'échantillons à l'aide
d'écouvillons bilatéraux de l'aisselle et de l'aine
Frottez fermement l'extrémité de l'écouvillon sur la surface de la peau de
l'aisselle gauche au moins 3 à 5 fois. Répétez la procédure avec le même
écouvillon sur la surface de la peau de l'aisselle droite.
Avec le même écouvillon que celui utilisé pour l'aisselle, frottez fermement
l'extrémité de l'écouvillon sur la surface de la peau de l'aine gauche pendant
au moins 3 à 5 fois. Répétez la procédure sur le côté droit. Transférez l'écou-
villon dans 1 mL de milieu de transport Amies liquide, « brisez l'écouvillon »
et fermez le tube.
Description de la procédure de prélèvement d'échantillons à l'aide
d'écouvillons nasaux
Insérez un écouvillon dans la narine parallèlement au palais. Laissez l'écou-
villon en place pendant quelques secondes pour absorber les sécrétions.
Faites tourner l'embout de l'écouvillon contre la muqueuse nasale 3 à 5 fois.
Transférez l'écouvillon dans 1 mL de milieu de transport Amies liquide, « bri-
sez l'écouvillon » et fermez le tube. Transférez 300 µL à l'aide d'une pipette
dans l'entrée de l'échantillon de la cartouche.
Description de la procédure de prélèvement d'échantillons à l'aide
d'écouvillons bilatéraux combinés de l'aisselle, de l'aine et du nez
Prenez l'écouvillon bilatéral de l'aisselle et de l'aine ainsi que l'écouvillon
nasal comme indiqué ci-dessus.
Après avoir transféré chaque écouvillon dans 1 mL de milieu de transport
Amies liquide, mélangez doucement les échantillons pour les homogénéiser
(en évitant la formation de mousse). Prélevez 150 µL à l'aide d'une pipette
dans l'échantillon nasal ou dans l'échantillon bilatéral de l'aisselle et de
l'aine, puis transférez-les dans l'entrée d'échantillon de la cartouche. Préle-
vez à nouveau 150 µL de l'échantillon correspondant du type d'échantillon
restant et transférez-les dans l'entrée d'échantillon de la cartouche. Mélan-
gez délicatement l'échantillon dans l'entrée d'échantillon de la cartouche à
l'aide de la pipette (en évitant la formation de mousse).
N'utilisez pas d'échantillons visqueux difficiles à pipeter.
Vivalytic C. auris
– Manuel de l'utilisateur
).
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