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Vivalytic C. auris
– Instruções de utilização
Reagentes
Todos os reagentes necessários para o processamento das amostras estão
incluídos no cartucho. O processamento inclui lise celular, extração de ácidos
nucleicos, amplificação e deteção de ADN.
Os reagentes são esferas de PCR, tampões de ligação, tampões de lavagem
e tampões de eluição. As esferas PCR contêm polimerase de ADN, primers e
sondas. O tampão de ligação facilita a ligação dos ácidos nucleicos durante
o processo de purificação. O tampão de lavagem é uma formulação de diversos
sais e solventes para remover impurezas, p. ex., proteínas durante o processo
de extração. O tampão de eluição é um tampão de baixo teor de sal e contém os
ácidos nucleicos purificados no final do processo de extração.
Tipo/meio de amostra
O teste foi concebido para utilização num exsudado bilateral humano combi-
nado de axila, virilha e nasal ou exsudados nasais em meio de liquid Amies
(sistema de colheita e transporte Copan Liquid Amies Elution Swab (eSwab®)
Collection and Transport System, ref. 480CE, COPAN Italia s.p.a.).
Efetue a colheita de amostras e armazene-as conforme indicado nas instruções
do fabricante.
No caso de a amostra não ser processada imediatamente após a colheita da
amostra, os ácidos nucleicos são preservados em meio de transporte Liquid
Amies durante até 5 dias à temperatura ambiente, 7 dias a 4 °C e até 6 meses a
−20 °C (consulte as instruções de utilização do eSwab®
).
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Preparação da amostra
Utilize duas zaragatoas tufadas regulares (FLOQSwabs® COPAN Italia s.p.a.)
para colher amostras humanas separadamente em 1 ml de Liquid Amies. A
primeira zaragatoa é utilizada para a amostra bilateral de virilha e axila e a
segunda zaragatoa é utilizada para a amostra nasal.
Descrição do procedimento de colheita de amostra utilizando exsuda-
dos bilaterais de virilha e axila
Esfregue a ponta da zaragatoa com firmeza na superfície da pele da axila
esquerda pelo menos 3 a 5 vezes. Repita o procedimento com a mesma zara-
gatoa na superfície da pele da axila direita.
Com a mesma zaragatoa utilizada na axila, esfregue a ponta da zaragatoa
com firmeza na superfície da pele da virilha esquerda pelo menos 3 a 5 ve-
zes. Repita o procedimento no lado direito. Transfira o exsudado para 1 ml
de meio de transporte Liquid Amies, "parta a zaragatoa" e feche o tubo.
Descrição do procedimento de colheita de amostra utilizando exsuda-
dos nasais
Insira uma zaragatoa na narina paralelamente ao palato. Deixe ficar a zara-
gatoa durante alguns segundos para absorver secreções. Rode a ponta da
zaragatoa na mucosa nasal 3 a 5 vezes. Transfira o exsudado para 1 ml de
meio de transporte Liquid Amies, "parta a zaragatoa" e feche o tubo. Transfi-
ra 300 µl com uma pipeta para a entrada de amostra do cartucho.
Descrição do procedimento e colheita de amostra utilizando exsuda-
dos bilaterais de combinação de axila, virilha e nasais
Realize o exsudado bilateral de axila e virilha e no exsudado nasal conforme
supramencionado.
Depois de transferir cada exsudado para 1 ml de meio de transporte Liquid
Amies, misture as amostras de forma delicada para homogeneização (evite
a formação de espuma). Retire 150 µl com uma pipeta de cada amostra
nasal ou da amostra bilateral de axila e virilha e transfira para a entrada de
amostra do cartucho. Volte a retirar 150 µl de amostra correspondente do
restante tipo de amostra e transfira para a entrada de amostra do cartucho.
Misture a amostra de forma delicada na entrada de amostra do cartucho,
utilizando a pipeta (evite a formação de espuma).
Não utilize amostras viscosas que são difíceis de pipetar.
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