3M Molecular Detection Assay 2 Manuel D'instructions page 44

La dimensione consigliata dell'area di campionamento per verificare la presenza o assenza di patogeni sulla superficie è di
almeno 100 cm (10 cm x 10 cm o 4" x 4"). In caso di campionamento con una spugna, coprire l'intera area procedendo in
2
due direzioni (da sinistra a destra e dall'alto in basso) o raccogliere i campioni ambientali seguendo il proprio protocollo di
campionamento attuale o le linee guida
1. Lasciare che il mezzo di arricchimento brodo di Demi-Fraser (comprendente il citrato ferrico di ammonio) si equilibri alla
temperatura ambiente del laboratorio.
2. Combinare asetticamente il terreno di arricchimento e il campione secondo le tabelle 2, 3 o 4.
3. Omogeneizzare a fondo con miscelatore, agitatore o miscelazione manuale o a vortice per 2 ± 0,2 minuti. Incubare a
37 ± 1 °C per 24-30 ore secondo le tabelle 2. 3 o 4.
Tabella 2: Protocolli di arricchimento generali utilizzando il mezzo di arricchimento brodo di Demi-Fraser a 37 ±1 °C e il
brodo di Fraser secondo necessità.
Matrice Dimensione
campione campione
Carni,
pollame,
frutti di
mare e
pesce
trattati con
calore, cotti
o stagionati.
Prodotti
caseari
25 g
trattati con
calore/
pastorizzati
Prodotti
agricoli e
verdure
Alimenti
multicom-
ponenti
1 spugna
Campioni
ambientali
1 tampone
Carne
cruda,
pollame, 25 g
frutti di
mare, pesce
Matrice
campione
Dimensione
campione
Prodotti
caseari 25 g
crudi
(a) Al brodo di Demi-Fraser e Fraser deve sempre essere aggiunto il supplemento per brodo Fraser (citrato ferrico di
ammonio) durante l'arricchimento primario o secondario.
(b) Volume del campione trasferito nei tubi della soluzione di lisi. Fare riferimento alla fase 4.6 della sezione Lisi.
, USDA FSIS MLG
(1)
Temperatura
Volume del
di
brodo di
arricchi-
arricchi-
mento
mento (ml)
(±1 °C)
225 37
100 o 225 37
10 37
475 37
Arricchimento principale
(brodo Demi-Fraser)
(a)
Volume del Temperatura
brodo di di arricchi-
arricchi- mento
mento (ml) (±1 °C)
225 37
o ISO 18593 .
(2) (7)
Tempo di
arricchi-
mento (h)
24-30
24-30
24-30
28-32
Arricchimento secondario
(brodo Fraser)
Temperatura
Tempo di
Dimensione
arricchi-
campione
mento (h)
Trasferire
0,1 ml nei
20-24
10 ml di
brodo Fraser
5
IT (Italiano)
(a)
di Tempo di
campione
arricchi- arricchi-
mento mento (h)
(±1 °C)
37 20-24
Volume
dell'analisi
del
(b)
10 μl