3M Molecular Detection Assay 2 Manuel D'instructions page 132

7. Quando todas as amostras tiverem sido transferidas, transfira 20 μL de CN (meio de enriquecimento estéril, por
exemplo, caldo Demi-Fraser) para um tubo LS. Não utilize água como CN.
8. Verifique se a temperatura do 3M Bloco de Aquecimento para Detecção Molecular está a 100 ± 1°C.
9. Coloque a prateleira descoberta de tubos LS no 3M Bloco de Aquecimento para Detecção Molecular e aqueça por 15 ±
1 minutos. Durante o aquecimento, a solução LS irá mudar de cor de rosa (frio) para amarelo (quente).
Amostras que não foram tratadas com aquecimento de forma adequada durante a etapa lise do ensaio, podem ser
consideradas um risco biológico potencial e NÃO devem ser envolvidas no 3M Equipamento de Detecção Molecular.
10. Retire o suporte descoberto de tubos LS do bloco de aquecimento e deixe esfriar no 3M Bloco de Resfriamento para
Detecção Molecular por pelo menos 5 minutos (e no máximo 10 minutos). O 3M Bloco de Resfriamento Molecular,
usado em temperatura ambiente sem a 3M Bandeja do Bloco de Resfriamento para Detecção Molecular, deve ser
colocado diretamente sobre a bancada do laboratório. Quando resfriada, a solução de lise voltará à cor rosa.
11. Retire o suporte de tubos LS do 3M Bloco de Resfriamento para Detecção Molecular.
Amplificação
1. É necessário um tubo de reagente para cada amostra e para o NC.
1.1 Podem ser cortadas tantas tiras para tubos de reagente quantas forem desejáveis, de acordo com o número de
tubos. Selecione o número de tubos de reagente individuais ou tiras de 8 tubos necessários.
1.2 Coloque os tubos de reagentes em uma prateleira vazia.
1.3 Evite agitar os granulados reagentes da parte inferior dos tubos.
2. Selecione 1 tubo de Controle de Reagentes (RC) e coloque na prateleira.
3. Para evitar contaminação, destampe uma tira de tubo de reagentes de cada vez e utilize um novo ponteiro de pipeta
para cada etapa da transferência.
4. Transfira o lisado aos tubos de reagentes e ao tubo RC, conforme descrito abaixo:
Primeiro, transfira cada lisado da amostra para dentro de tubos de reagentes individuais, seguido pelo NC. Por
último, hidrate o tubo RC.
5. Utilize a 3M™ Ferramenta de Tampar/Destampar para Detecção Molecular - Reagente para destampar os tubos de
reagentes – uma tira de tubos de reagente de cada vez. Descarte a tampa.
5.1 Transfira 20 µL de lisado de amostra do tubo LS para o tubo reagente correspondente. Distribua de forma a
evita a agitação dos granulados. Misture inserindo e retirando a pipeta de forma suave 5 vezes.
5.2 Repita a etapa 5.1 até que todos os lisados das amostras individuais tenham sido adicionados a um tubo de
reagente correspondente na tira.
5.3 Cubra os tubos de reagente com as tampas adicionais fornecidas e utilize o lado arredondado da 3M Ferramenta
de Tampar/Destampar para Detecção Molecular - Reagente para apertar com um movimento de vai e vem,
garantindo que a tampa fique bem justa.
5.4 Repita a etapa 5.1, conforme necessário, para o número de amostras a serem testadas.
5.5 Quando todos os lisados de amostra tiverem sido transferidos, repita a etapa 5.1 para transferir 20 µL de lisado NC
para um tubo de reagente.
5.6 Transfira 20 µL de lisado do CN para um tubo RC. Distribua de forma a evita a agitação dos granulados. Misture
inserindo e retirando a pipeta de forma suave 5 vezes.
6. Carregue os tubos tampados em uma 3M Bandeja de Carga Rápida para Detecção Molecular limpa e descontaminada.
Feche e trave a tampa da 3M Bandeja de Carga Rápida para Detecção Molecular.
00:15:00
99-101ºC
00:05:00
9
PT (Português)
20-25ºC