3M Molecular Detection Assay 2 Manuel D'instructions page 128

O tamanho recomendado da área de amostragem para verificar a presença ou ausência do agente patogênico na
superfície é de pelo menos 100 cm
área indo em duas direções (da esquerda para a direita e de cima para baixo) ou colete amostras ambientais seguindo seu
protocolo de amostragem atual ou de acordo com as diretrizes FDA BAM
1. Deixe o meio de enriquecimento do caldo Demi-Fraser (inclui citrato de amônio férrico) equilibrar a temperatura
ambiente de laboratório.
2. Combine de maneira asséptica o meio de enriquecimento e a amostra, de acordo com as Tabelas 2, 3 e 4.
3. Faça a homogeneização completa misturando, usando Stomacher, ou misturando manualmente ou por agitação por
2 ± 0,2 minutos. Incube a 37 ± 1°C por 24-30 horas de acordo com as Tabelas 2, 3 ou 4.
Tabela 2: Protocolos de enriquecimento gerais usando enriquecimento do Caldo Demi-Fraser a 37 ±1°C e do Caldo Fraser
conforme necessário.
Tamanho
Matriz de
da
amostra
amostra
Carnes curadas,
aves, frutos
do mar e
peixes cozidos
/ tratados
termicamente
Produtos lácteos
pasteurizados /
25 g
tratados
termicamente
Produção e
legumes
Alimentos
com múltiplos
componentes
1 esponja
Amostras
ambientais
1 cotonete
Carne crua, aves,
frutos do mar e 25 g
peixes
Matriz de
amostra
Tamanho
da
amostra
Produtos lácteos
25 g
crus
(a) Os caldos Demi-Fraser e Fraser devem ser sempre suplementados com suplemento Caldo Fraser (citrato de amônio
férrico) durante o enriquecimento primário ou secundário.
(b) Volume da amostra transferido para tubos de solução lise. Consulte a Etapa 4,6 da seção Lise.
(10 cm x 10 cm ou 4" x 4"). Ao coletar amostras com uma esponja, abranja toda a
2
Volume do
Temperatura
caldo de
de enriqueci-
enriqueci-
mento
mento
(±1°C)
(mL)
225 37
100 ou 225 37
10 37
475 37
Enriquecimento primário
(Caldo Demi-Fraser)
(a)
Volume do
Temperatura
caldo de
de enriqueci-
enriqueci-
mento
mento
(±1°C)
(mL)
225 37
, USDA FSIS MLG
(1)
Tempo de
enriqueci-
mento
(h)
24-30
24-30
24-30
28-32
Enriquecimento secundário
(Caldo Fraser)
Tempo de
Tamanho Temperatura
enriqueci-
da de enriqueci-
mento
amostra mento (±1°C)
(h)
Transferir
0,1 mL
20-24 em 10 mL
de caldo
Fraser
5
PT (Português)
ou ISO 18593 .
(2) (7)
(a)
Volume da
análise da
Tempo de
amostra
enriqueci-
mento (h)
37 20-24
(b)
10 μL