3M Molecular Detection Assay 2 Manuel D'instructions page 109

7. Se igjennom og bekreft den konfigurerte gjennomkjøringen i programvaren 3M Molekylær deteksjon.
8. Klikk på Start-knappen i programvaren og velg et instrument å bruke. Det valgte instrumentets lokk åpnes automatisk.
9. Plasser 3M Brett til hurtiglading for molekylær deteksjon inn i 3M Instrument for molekylær deteksjon og lukk lokket for
å starte testen. Resultatene er klare innen 75 minutter, mens positive blir kanskje oppdaget raskere.
10. Etter at testen er fullført, fjern 3M Brett til hurtiglading for molekylær deteksjon fra 3M Instrument for molekylær
deteksjon og fjern rørene ved å senke dem i en 1–5 % (v:v i vann) husholdningsblekemiddel i én time og borte fra testens
forberedelsesområde.
Merknad: For å minimere risikoen for falske positive resultat på grunn av krysskontaminering, skal aldri reagensrør
som inneholder amplifisert DNA åpnes. Dette inkluderer reagenskontroll-, reagens- og matrisekontrollrør. Alltid
kaste forseglede rør ved å senke dem i en 1–5 % (v:v i vann) husholdningsblekemiddel i én time og borte fra testens
forberedelsesområde.
Resultater og tolking
En algoritme tolker lysutmatingskurven som er resultatet av deteksjonen av nukleinsyresekvenser. Resultatene analyseres
automatisk av programvaren og er fargekodet basert på resultatet. Et positivt eller negativt resultat fastslås av analysen av
et antall unike kurveparametere. Presumptive positive resultater rapporteres i sanntid mense Negative og Inspiserresultater
vil bli vist etter at kjøringen er fullført.
Presumptivt positive prøver bør bekreftes i henhold til standard laboratorieprøveprosedyrer eller ved å følge den
aktuelle referansemetodebekreftelsen
oppformeringsbuljong, fulgt av etterfølgende plettering og bekreftelse av isolater ved hjelp av aktuelle biokjemiske og
serologiske metoder.
I sammenheng med NF-VALIDERING, må alle prøver som identifiseres som positive av 3M molekylær deteksjonstest 2 for
Listeria bekreftes av en av følgende tester:
Alternativ 1: Ved hjelp av ISO 11290-1
Alternativ 2: Ved å implementere en bekreftelsesmetode som består av følgende: Overfør 0,1 ml av Demi-Fraser-buljong.
Lag utstryk direkte på utvalgt agar som beskrevet i ISO 11290-1
Alternativ 3: Ved hjelp av nukleinsyresonder som beskrevet i EN ISO 7218
utvalgte agar (se alternativene 1 eller 2).
Alternativ 4: Ved hjelp av en hvilken som helst annen metode sertifisert NF VALIDERING, med et prinsipp som må værer
forskjellig fra 3M molekylær deteksjonstest 2 for Listeria. Den fullstendige protokollen som beskrives for denne andre
validerte metoden må benyttes. Alle steg forut for start på bekreftelsen må være felles for begge metoder.
I tilfelle av uoverensstemmende resultater (presumptivt positive med den alternative metoden, ikke-bekreftede med en av
de metodene som beskrives ovenfor) må laboratoriet følge de nødvendige stegene for å sikre validiteten av det oppnådde
resultatet.
Merk: Ikke engang en negativ prøve vil gi et null-resultat ettersom systemet og 3M Molekylær deteksjonstest 2 for
Listeria amplifikasjonsreagenser har en «bakgrunn», relativ lys-enhet (RLU).
I sjeldne tilfeller med uvanlig lysutmating, vil algoritmen merke dette som «Inspect» (inspiser). 3M anbefaler brukeren å
gjenta testen for alle inspiser-prøver. Dersom resultatet fortsatt er «Inspect», fortsett til bekreftelsestesten ved bruk av din
foretrukne metode eller som spesifisert i lokale forskrifter.
Hvis du har spørsmål om spesifikke bruksområder eller prosedyrer, besøk vårt nettsted på www.3M.com/foodsafety eller
ta kontakt med en lokal 3M-representant eller forhandler.
Vedlegg A. Avbrytelse av protokoll: Lagring og ny testing av varmebehandlede lysater
1. Lukk igjen lyseringsrøret med et rent lokk for å oppbevare en varmebehandlet lysat (se "LYSERING", 4.5)
2. Oppbevar ved 4 til 8 °C i opptil 72 timer.
3. Forbered en lagret prøve for amplifikasjon ved å vende 2–3 ganger for å blande.
, ved eventuelt å begynne med overføring fra primær til sekundær
(1, 2, 3)
standard som starter fra Demi-Fraser-oppformering
(3)
(3)
10
20 µL
.
standard, utført på isolerte kolonier, fra
(5)
NO (Norsk)