Дополнительная Информация - Leica BIOSYSTEMS BOND Ready-to-Use ISH Lambda Probe PB0669 Mode D'emploi

Реактив, представляющий собой положительный контроль
Для получения информации о сохранности нуклеиновых кислот в тканях, а также о возможности их достичь с помощью зонда
при исследовании срезов каждого образца, взятого у пациента, вместо зонда Lambda Probe, предназначенного для испытаний,
используйте RNA Positive Control Probe PB0785, который служит в качестве положительного контроля. Если RNA Positive Control
Probe (РНК-зонд, использующийся в качестве положительного контроля), демонстрирует неудовлетворительные результаты с
точки зрения положительного окрашивания, результаты исследования образцов следует считать недостоверными.
Ткань, полученная у пациента
Исследуйте образцы ткани, взятой у пациента и окрашенной с использованием зонда Lambda Probe, в последнюю очередь.
Интенсивность положительного окрашивания следует оценивать в контексте любого неспецифического фонового окрашивания
RNA Negative Control Probe PB0809 (РНК-зонда, являющегося отрицательным контролем PB0809).
Ожидаемые результаты
Нормальные ткани
PB0669 обнаруживает мРНК лямбда-легкой цепи в В-клетках селезенки и миндалины, а также случайные В-клетки в широком
диапазоне изучаемых тканей, включая грудную молочную железу, шейку матки, печень, слюнную железу, надпочечники,
гортань, тонкую кишку и толстую кишку. В-клетки-предшественники также показали положительный результат для мРНК
лямбда в костном мозге. Дополнительное окрашивание можно обнаружить в эпителиальных клетках щитовидной железы,
простаты, гортани и пищевода, канальцев почек, секреторных клетках надпочечников, а также клетках Лейдига. (Общее число
исследованных нормальных тканей = 109).
Патологически измененные ткани
PB0669 окрашивал в 4/6 случаев миелом — опухолей из плазматических клеток. Окрашивания не наблюдалось при следующих
патологических состояниях: T-клеточные лимфомы (0/3), диффузные крупноклеточные В-лимфоцитарные лимфомы (0/2),
лимфомы Ходжкина (0/2), лимфомы Бёркитта (0/1), опухоли легкого (0/3), опухоли яичников (0/3), опухоли печени (0/2), опухоли
щитовидной железы (0/2), опухоли пищевода (0/2), опухоли молочной железы (0/2), метастатические опухоли неизвестного
происхождения (0/2), опухоли головного мозга (0/2), опухоли яичка (0/2), опухоли кожи (0/2), опухоли толстой кишки (0/1),
опухоли желудка (0/1), опухоли прямой кишки (0/1), опухоли гортани (0/1) и опухоли тимуса (0/1). (Общее число исследованных
патологически измененных образцов = 41).
PB0669 рекомендуется использовать для обнаружения мРНК легких лямбда-цепей.
Ограничения, специфичные для этого продукта
Зонд Lambda Probe оптимизирован компанией Leica Biosystems для применения с реактивами Anti-Fluorescein Antibody, BOND
Polymer Refine Detection и дополнительными реактивами BOND. Пользователи, отклоняющиеся от рекомендованных процедур
анализа, должны брать на себя ответственность за интерпретацию результатов исследований пациентов, выполненных в
таких условиях. Продолжительность выполнения протокола может варьировать в зависимости от варианта фиксации тканей
и эффективности ферментативного расщепления и должна определяться эмпирически. В процессе оптимизации условий
демаскирования антигенов и продолжительности выполнения протокола должен использоваться RNA Negative Control Probe
(РНК-зонд, выполняющий функции отрицательного контроля).
Поиск и устранение неполадок
Источник (6) может помочь в принятии мер по устранению неполадок.
Исследуемые образцы необходимо дополнить соответствующими тканями и реактивами, использующимися в качестве
контроля.
С сообщениями о необычном окрашивании обращайтесь к своему местному дистрибьютору или в региональный офис компании
Leica Biosystems.
Дополнительная информация
Дополнительная информация, касающаяся проведения гибридизации in situ с использованием реактивов BOND, содержится
в рубриках «Принцип метода», «Необходимые материалы», «Подготовка образцов», «Контроль качества», «Проверка
достоверности анализа», «Интерпретация окрашивания», «Значения символов в маркировке продукции» и «Общие
ограничения» раздела «Применение реактивов BOND» в документации пользователя системы BOND.
Список источников
1. Levy R, Warnke R, Dorfman RF et al. The monoclonality of human B-cell lymphomas. Journal of Experimental Medicine.
1977;145:1014–1024.
2. Friedman JM, Fialow PJ. Cell marker studies of human tumorigenesis. Transplantation Review. 1976;28:17–33.
3. McNicol AM, Farquharson MA, Lee FD, Foulis AK. Comparision of in situ hybridisation and polymerase chain reaction in the diagnosis
of B cell lymphoma. Journal of Clinical Pathology. 1998;51:229–233.
4. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
5. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
6. Wilkinson DG. The theory and practice of in situ hybridization. In: Wilkinson DG. (ed.) In situ Hybridization A practical approach. 2
Edition. New York: Oxford University Press, 1998, pp.18–20.
Дата выпуска
17 Февраль 2020
PB0669
Page 49
nd