Table des Matières
Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
•
A mintákat fixálás előtt és után, valamint a velük érintkező összes anyagot fertőzések terjesztésére képes anyagként kell kezelni, és
megfelelő körültekintéssel kell ártalmatlanítani
érintkezését a reagensekkel és a mintákkal. Ha a reagensek vagy minták érzékeny területtel érintkeznek, bő vízzel mossa le az
érintett területet. Forduljon orvoshoz.
•
Minden potenciálisan toxikus összetevő ártalmatlanításával kapcsolatban kövesse a szövetségi, állami és helyi előírásokat.
•
Minimálisra kell csökkenteni a reagensek mikrobiális szennyeződését, különben megnövekedhet a nem specifikus festődés.
•
A megadottaktól eltérő feltárási körülmények, inkubációs idők és hőmérsékletek hibás eredményekhez vezethetnek. A felhasználónak
minden ilyen jellegű változtatást validálnia kell.
Használati útmutató
A Lambda Probe próba automata BOND rendszerrel (így a Leica BOND-MAX rendszerrel vagy a Leica BOND-III rendszerrel) és az
Anti-Fluorescein Antibody antitesttel és a BOND Polymer Refine Detection kittel való együttes használatra lett kifejlesztve. A Lambda
Probe próbához javasolt festési protokoll az ISH Protocol A. Az enzimes feltáráshoz a BOND Enzyme Pretreatment Kit, Enzyme 1 oldat
15 percig tartó alkalmazása javasolt.
Mindig kell megfelelő szövet- és reagenskontrollokat alkalmazni. A szövet- és reagenskontrollokhoz tartozó protokollnak meg kell felelnie
a Lambda Probe próba protokolljának.
Minőség-ellenőrzés
A felhasználó laboratóriumában alkalmazott szövetfeldolgozási és technikai eljárások eltérései jelentős különbséget okozhatnak az
eredményekben, ami az alábbi eljárásokon túl belső kontrollok rendszeres futtatását teszi szükségessé.
Pozitív szövetkontroll
A megfelelő szövet-előkészítés és festési technikák ellenőrzésére használatos.
Minden tesztelési körülményegyüttes esetében és minden megfestési sorozatban kell alkalmazni egy pozitív szövetkontrollt. A gyengén
pozitív festődésű szövet alkalmasabb az erősebben pozitív festődésű szövetnél az optimális minőség-ellenőrzéshez, valamint a
kismértékű reagensbomlás észleléséhez.
Negatív szövetkontroll
A pozitív szövetkontroll után azért kell megvizsgálni, hogy a próba célnak megfelelő jelölésének specificitását ellenőrizni lehessen.
Ezenkívül a legtöbb szövetmetszetben jelen lévő különböző sejttípusok gyakran használhatók negatív kontrollként, de ezeket a
felhasználónak kell ellenőriznie.
Negatív reagenskontroll
A nem specifikus festődés kiértékeléséhez és a célsejtekben létrejövő specifikus festődés jobb értelmezéséhez a Lambda Probe próba
helyett alkalmazza az RNA Negative Control Probe PB0809 készítményt minden betegminta esetén egy metszetnél.
Pozitív reagenskontroll
A nukleinsavak szöveti megtartottságával, valamint a nukleinsavak próba általi hozzáférhetőségével kapcsolatos információk
szerzéséhez a Lambda Probe próba helyett alkalmazza az RNA Positive Control Probe PB0785 készítményt minden betegminta esetén
egy metszetnél. Ha az RNA Positive Control Probe nem mutat pozitív festődést, a vizsgált minták eredményeit érvénytelennek kell
tekinteni.
Betegszövet
A Lambda Probe próbával festett betegmintákat vizsgálja meg utolsóként. A pozitív festődés intenzitását az RNA Negative Control Probe
PB0809 esetleges nem specifikus háttérfestődésének viszonylatában értékelje.
Várható eredmények
Normál szövetek
A PB0669 kimutatta a lambda könnyűlánc mRNS-t a lép és a tonsilla B-sejtjeiben, valamint az alábbi szövetek elszórt B-sejtjeiben: emlő,
méhnyak, máj, nyálmirigy, fültőmirigy, mellékvese, gége, vékonybél és vastagbél. A prekurzor B-sejtek szintén pozitívak voltak lambda
mRNS-re a csontvelőben. További festődés volt észlelhető a pajzsmirigy, prosztata, gége és nyelőcső hámsejtjei, a vesetubulusok, a
mellékvesék szekretoros sejtjei és a Leydig-sejtek esetén. (Vizsgált normál esetek összesített száma = 109).
Kóros szövetek
A PB0669 a 6 plazmasejtes mielóma közül 4-et festett meg. Nem volt festődés észlelhető T-sejtes limfómák (0/3), diffúz nagy B-sejtes
limfómák (0/2), Hodgkin-limfómák (0/2), a Burkitt-limfóma (0/1), tüdődaganatok (0/3), petefészek-daganatok (0/3), májdaganatok
(0/2), pajzsmirigydaganatok (0/2), nyelőcsődaganatok (0/2), emlődaganatok (0/2), ismeretlen eredetű metasztatikus daganatok (0/2),
agydaganatok (0/2), heredaganatok (0/2), bőrdaganatok (0/2), vastagbéldaganat (0/1), gyomordaganat (0/1), végbéldaganat (0/1),
gégedaganat (0/1) és a csecsemőmirigy tumora (0/1) esetén. (Vizsgált kóros esetek összesített száma = 41).
A PB0669 a lambda könnyűlánc mRNS detektálására ajánlott.
Termékspecifikus korlátozások
A Lambda Probe terméket a Leica Biosystems az Anti-Fluorescein Antibody antitesttel, a BOND Polymer Refine Detection kittel és
a BOND segédreagensekkel való használatra optimalizálta. A tesztelési eljárásoktól való eltérés esetén a felhasználó felelőssége a
betegeredmények értelmezése az adott körülmények között. A protokoll végrehajtásához szükséges idő a szövet fixálásának és az
enzimes emésztés hatékonyságának eltérései miatt változó lehet, ezért tapasztalati alapon történő meghatározást igényel. A feltárási
körülmények és a protokollidők optimalizálásakor használni kell az RNA Negative Control Probe készítményt.
. Soha ne pipettázza szájjal a reagenseket, továbbá kerülje a bőr és a nyálkahártyák
5
PB0669
Page 42
Publicité
Table des Matières
