Table des Matières
Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
•
Bortskaffelse af potentielt toksiske komponenter skal ske i overensstemmelse med gældende statslig eller lokal lovgivning.
•
Mikrobiel kontamination af reagenser skal minimeres for at undgå en øget ikke-specifik farvning.
•
Genfinding, inkubationstider eller -temperaturer ud over de specificerede kan give fejlagtige resultater. Enhver ændring af denne art
skal valideres af brugeren.
Brugsanvisning
Lambda Probe er udviklet til brug for det automatiserede BOND systemet (bestående af Leica BOND-MAX-systemet og Leica BOND-
III-systemet) i kombination med Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer Refine Detection og BOND-hjælpereagenser. Brugere den
anbefalede farvningsprotokol for Lambda Probe er ISH Protocol A. Til enzymforbehandling, som anbefales, bruges BOND Enzyme
Pretreatment Kit, Enzyme 1 i 15 minutter.
Der skal altid bruges egnede vævs- og reagenskontroller. Protokollen for vævs- og reagenskontrollerne skal svare til protokollen for
Lambda Probe.
Kvalitetskontrol
Forskelle i behandlingen af væv og forskelle i tekniske procedurer i brugerens laboratorium kan frembringe betydeligt varierende
resultater og nødvendiggøre regelmæssig udførelse af kontroller på stedet ud over nedenstående procedurer.
Positiv vævskontrol
Anvendes til påvisning af, at vævet er fremstillet korrekt, og at der er anvendt korrekte farvningsteknikker. Der bør inkluderes en positiv
vævskontrol for hvert sæt testbetingelser i hver farvekørsel. Svagt positivt farvet væv er mere egnet end kraftigt positivt farvet væv til
optimal kvalitetskontrol og påvisning af små niveauer af reagensnedbrydning.
Negativ vævskontrol
Skal undersøges efter den positive vævskontrol for at verificere specificiteten af mærkningen af proben i forhold til målstedet.
Alternativt frembyder de mange forskellige celletyper, der er til stede i de fleste vævssnit, ofte negative kontrolsteder, men dette skal
verificeres af brugeren.
Negativ reagenskontrol
Brug RNA Negative Control Probe PB0809 i stedet for Lambda Probe på et snit af hver patientprøve for at vurdere uspecifik farvning og
muliggøre bedre fortolkning af specifik farvning på målstedet.
Positiv reagenskontrol
Brug RNA Positive Control Probe PB0785 i stedet for Lambda Probe på et snit af hver patientprøve for at undersøge holdbarheden af
kernesyrerne og samtidig probens tilgængelighed til kernesyrerne. Hvis den RNA Positive Control Probe ikke udviser positiv farvning, må
testresultatet fortolkes som ikke brugbart.
Patientvæv
Undersøg patientprøver farvet med Lambda Probe sidst. Intensiteten af positiv farvning skal bedømmes i sammenhæng med uspecifik
baggrundsfarvning af RNA Negative Control Probe PB0809.
Forventede Resultater
Normala væv
PB0669 påviste lambda-mRNA i B-celler i milt og tonsil samt lejlighedsvis B-celle i en lang række af væv, herunder bryst, cervix, lever,
spytkirtel, parotidkirtel, binyre, larynx, tyndtarm og tyktarm. Precursor-B-celler var også positive for lambda-mRNA i knoglemarv.
Yderligere farvning blev også observeret i epitelceller i thyreoidea, prostata, larynx og øsofagus, tubuli i nyren, sekretoriske celler i
binyrerne og Leydigs celler. (Samlet antal evaluerede, normale tilfælde = 109).
Tumorvæv
PB0669 farvede 4/6 plasmacellemyelomer. Der blev ikke observeret farvning i T-cellelymfomer (0/3), diffuse storcellede B-cellelymfomer
(0/2), Hodgkins lymfomer (0/2), et Burkitts lymfom (0/1), lungetumorer (0/3), ovarietumorer (0/3), levertumorer (0/2), thyreoideatumorer
(0/3), øsofagustumorer (0/2), brysttumorer (0/2), metastatiske tumorer af ukendt oprindelse (0/2), hjernetumorer (0/2), testikeltumorer
(0/2), hudtumorer (0/2), en colontumor (0/1), en mavetumorer (0/1), en tumor i rectum (0/1), en tumor i larynx (0/1) og en thymustumor
(0/1). (Samlet antal evaluerede, abnorme tilfælde = 41).
PB0669 anbefales til påvisning af lambdakæde-messenger-RNA.
Produktspecifikke Begrænsninger
Lambda Probe er blevet optimeret hos Leica Biosystems til brug sammen med Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer Refine
Detection og BOND-hjælpereagenser. Brugere, som afviger fra anbefalede testprocedurer, må selv tage ansvaret for fortolkningen
af patientresultater under disse betingelser. Protokoltiderne kan variere på grund af variationer i vævsfiksering og effektiviteten af
enzymatisk nedbrydning og skal bestemmes empirisk. Der skal anvendes RNA Negative Control Probe ved optimering af genfi
ndingsbetingelser og protokoltider.
Fejlfinding
Reference 6 kan være til hjælp ved afhjælpende foranstaltninger.
Testprøver skal suppleres med de relevante vævs- og reagenskontroller.
Kontakt den lokale distributør eller Leica Biosystems' regionale kontor for at rapportere usædvanlig farvning.
Yderligere Oplysninger
Yderligere oplysninger om in situ-hybridisering med BOND-reagenser kan findes i "Anvendelse af BOND-reagenser" i BOND-
brugerdokumentationen under overskrifterne Proceduremæssige principper, Nødvendige materialer, Præparatklargøring,
Kvalitetskontrol, Analyseverifikation, Fortolkning af farvning, Nøgle til symboler på etiketter og Generelle begrænsninger.
PB0669
Page 27
Publicité
Table des Matières
