Table des Matières
Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
•
Angående avfallshantering av potentiellt toxiska material hänvisar vi till gällande europeiska, nationella och lokala bestämmelser och
förordningar.
•
Minimera mikrobiologisk kontamination av reagens. Om detta inte görs kan det leda till en ökad icke-specifik infärgning.
•
Återvinnande och andra inkubationstider eller temperaturer än de specificerade kan ge felaktiga resultat. Sådana förändringar ska
valideras av användaren.
Instruktioner Vid Användning
Lambda Probe har utvecklats för användning med det automatiska BOND-systemet (som innefattar systemen Leica BOND-MAX
och Leica BOND-III) i kombination med Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer Refine Detection och BOND hjälpreagenser. Det
rekommenderade färgningsprotokollet för Lambda Probe är ISH Protocol A. Enzymatisk förbehandling med BOND Enzyme Pretreatment
Kit, Enzyme 1 rekommenderas 15 minuter.
Använd alltid för ändamålet avsedda vävnads- och reagenskontroller. Vävnads- och reagensprotokollen ska överensstämma med
Lambda Probe-protokollet.
Kvalitetskontroll
Skillnader i vävnadsbehandling och tekniska metoder i användarens laboratorium kan ge stor variation i resultaten; regelbundna
internkontroller är därför nödvändiga utöver metoderna nedan.
Positiv vävnadskontroll
Används för att påvisa korrekt förberedda vävnader och rätt färgningstekniker. En positiv vävnadskontroll per testuppsättning bör ingå
vid varje färgningskörning. En vävnad med svag positiv färgning är bättre lämpad för optimal kvalitetskontroll och för att upptäcka låga
nivåer av reagensdegradering än en vävnad med stark positiv färgning.
Negativ vävnadskontroll
Bör undersökas efter den positiva vävnadskontrollen, för att bekräfta sondmärkningens specificitet gentemot målet.
Alternativt ger ofta den mängd olika celltyper som finns i de flesta vävnadssnitt upphov till negativa kontrollområden, men detta bör
kontrolleras av användaren.
Negativ reagenskontroll
Använd RNA Negative Control Probe PB0809 i stället för Lambda Probe på en begränsad del av varje patientprov för att utvärdera icke-
specifik färgning och underlätta tolkningen av specifik infärgning av målet.
Positiv reagenskontroll
Använd RNA Positive Control Probe PB0785 i stället för Lambda Probe på en begränsad del av varje patientprov för information om
bibehållande av nukleinsyror i vävnaden samt sondens tillgång till nukleinsyror. Om den positiva vävnadskontrollen inte uppvisar positiv
färgning bör resultat erhållna från testproverna anses vara ogiltiga.
Patientvävnad
Undersök patientprover färgade med Lambda Probe sist. Positiv färgningsintensitet bör utvärderas inom ramen för all ospecifik
bakgrundsfärgning av RNA Negative Control Probe PB0809.
Förväntade Resultat
Normala vävnader
PB0669 detekterade lambda-mRNA i B-celler i mjälte och tonsill, såväl som enstaka B-celler i flera olika vävnader inklusive bröst, cervix,
lever, spottkörtel, öronspottkörtel, binjure, struphuvud, tunntarm samt kolon. Prekursor B-celler var också positiva för lambda-mRNA
i benmärg. Ytterligare färgning sågs även i epitelialceller i sköldkörteln, prostata, struphuvud och matstrupe, njurgångar, sekretoriska
celler i binjurarna samt Leydig-celler. (Totalt antal utvärderade normalfall = 109).
Tumörvävnader
PB0669 färgade 4/6 plasmacellsmyelom. Ingen färgning sågs i T-cellslymfom (0/3), diffusa, stora B-cellslymfom (0/2), Hodgkins lymfom
(0/2), ett Burkitts lymfom (0/1), lungtumörer (0/3), äggstockstumörer (0/2), levertumörer (0/3), sköldkörteltumörer (0/2), esofagealtumörer
(0/2), brösttumörer (0/2), metastatiska tumörer av okänt ursprung (0/2), hjärntumörer (0/2), testikeltumörer (0/2), hudtumörer (0/2), en
kolontumör (0/1), en magsäckstumör (0/1), en rektal tumör (0/1), en struphuvudtumör (0/1) samt en thymustumör (0/1). (Totalt antal
utvärderade onormala fall = 41).
PB0669 rekommenderas för detektion av lambda budbärar-RNA.
Produktspecifika Begränsningar
Lambda Probe har optimerats hos Leica Biosystems för användning med Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer Refine Detection
och BOND hjälpreagenser. Användare som avviker från rekommenderat testförfarande måste vid ändrade förhållanden ta ansvar för
tolkningen av patientresultaten. Protokolltiderna kan variera på grund av variationer i vävnads fixering och hur effektivt enzymerna
smälter och skall fastställas empiriskt. RNA Negative Control Probe ska användas då förhållanden för återvinnande och protokolltider
ska optimeras.
Felsökning
Referens 6 kan vara till hjälp vid felsökningsåtgärd.
Testprover ska kompletteras med lämpliga vävnads- och reagenskontroller.
Kontakta en lokal distributör eller Leica Biosystems regionkontor för att rapportera onormal infärgning.
Mer Information
Mer information om in situ-hybridisering med BOND-reagens finns under rubrikerna Bakgrund till metoden, Nödvändig materiel,
Förbereda provet, Kvalitetskontroll, Verifiering av assayer, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna
begränsningar i "Använda BOND-reagens" i BONDs användardokumentation.
PB0669
Page 21
Publicité
Table des Matières
