Leica BIOSYSTEMS BOND Ready-to-Use ISH Lambda Probe PB0669 Mode D'emploi page 16

• Las muestras, antes y después de ser fijadas, y cualquier material en contacto con ellas, deben ser tratados como sustancias
capaces de transmitir infecciones y deben ser eliminadas con las precauciones correspondientes
con la boca, y evite el contacto de la piel y las mucosas con reactivos o muestras. Si algún reactivo o alguna muestra entra en
contacto con zonas sensibles, lávelas con agua abundante. Consulte a un médico.
• Consulte la normativa federal, nacional o local referente a la eliminación de sustancias potencialmente tóxicas.
• Minimice la contaminación microbiana de los reactivos, ya que puede producir un aumento de las tinciones inespecíficas.
• Los tiempos de exposición e incubación, y las temperaturas diferentes de las especificadas pueden dar resultados erróneos.
Cualquier cambio que se produzca deberá ser validado por el usuario.
Instrucciones de Uso
Lambda Probe se ha desarrollado para usarse en el sistema automatizado BOND (incluye el sistema Leica BOND-MAX y el sistema
Leica BOND-III) en combinación con Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer Refine Detection y reactivos auxiliares BOND. El
protocolo de tinción recomendado para Lambda Probe es ISH Protocol A. El pretratamiento enzimático se recomienda usando BOND
Enzyme Pretreatment Kit, Enzyme 1, durante 15 minutos.
Siempre se deben usar controles apropiados de tejidos y de reactivos. El protocolo para los controles de tejidos y de reactivos debe
corresponder al de Lambda Probe.
Control de calidad
Las diferencias en el procesamiento de los tejidos y en los procedimientos técnicos del laboratorio del usuario pueden producir una
variabilidad significativa en los resultados; por ello, es necesario que éste lleve a cabo regularmente sus propios controles, además de
los siguientes procedimientos.
Control positivo de tejido
Se utiliza para indicar la preparación correcta de los tejidos y las técnicas de tinción adecuadas. Debe incluirse un control positivo de
tejido por cada conjunto de condiciones de ensayo en cada serie de tinciones realizada. Un tejido con una tinción positiva débil es más
adecuado que un tejido con una tinción positiva intensa para un control de calidad óptimo y para detectar niveles bajos de degradación
del reactivo.
Control negativo de tejido
Debe examinarse después del control positivo de tejido, a fin de verificar la especificidad del marcado de la sonda en la diana.
O bien, la variedad de diferentes tipos de células presentes en la mayoría de los cortes de tejido ofrece con frecuencia lugares de
control negativo, pero esto debe ser verificado por el usuario.
Control negativo de reactivo
Utilice RNA Negative Control Probe PB0809 en lugar de Lambda Probe con un corte de cada muestra del paciente a fin de evaluar la
tinción no específica y obtener una mejor interpretación de la tinción específica en la diana.
Control positivo de reactivo
Utilice RNA Positive Control Probe PB0785 en lugar de Lambda Probe con un corte de cada muestra del paciente a fin de brindar
información acerca de la conservación de los ácidos nucleicos en el tejido y de la accesibilidad de los ácidos nucleicos para la sonda. Si
RNA Positive Control Probe no muestra tinción positiva, los resultados de las muestras analizadas deben considerarse no válidos.
Tejido del paciente
Examine las muestras del paciente teñidas con Lambda Probe al final. La intensidad de la tinción positiva debe valorarse en el contexto
de cualquier tinción de fondo no específica de RNA Negative Control Probe PB0809.
Resultados Esperados
Tejidos normales
PB0669 detectó ARNm lambda en células B del bazo y la amígdala, así como en células B aisladas en una amplia gama de tejidos,
incluido el mamario, el cervicouterino, el hepático, el de la glándula salival, el de la glándula parótida, el de la glándula suprarrenal,
el de la laringe, el del intestino grueso y el del intestino delgado. Las células B precursoras también dieron resultado positivo para
ARNm lambda en la médula ósea. También se observó tinción en células epiteliales de la glándula tiroidea, la próstata, la laringe y el
esófago, y en los túbulos del riñón, las células secretoras de las glándulas suprarrenales y las células de Leydig. (Número total de casos
normales evaluados = 109).
Tejidos tumorales
PB0669 tiñó 4/6 mielomas de células plasmáticas. No se observó tinción en los linfomas de células T (0/3), los linfomas B difusos de
células grandes (0/2), los linfomas de Hodgkin (0/2), el linfoma de Burkitt (0/1), los cánceres de pulmón (0/3), los cánceres ováricos
(0/3), los cánceres hepáticos (0/2), los cánceres tiroideos (0/2), los cánceres esofágicos (0/2), los cánceres de mama (0/2), los cánceres
metastásicos de origen desconocido (0/2), los tumores cerebrales (0/2), los tumores testiculares (0/2), los cánceres de piel (0/2), el
cáncer de colon (0/1), el cáncer gástrico (0/1), el tumor rectal (0/1), el cáncer de laringe (0/1) y el cáncer de timo (0/1). (Número total de
casos anormales evaluados = 41).
Se recomienda PB0669 para detectar el ARNm de las cadenas ligeras lambda.
PB0669
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. No pipetee nunca los reactivos
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