Дополнительная Информация - Leica BIOSYSTEMS BOND Ready-to-Use ISH RNA Negative Control Probe PB0809 Mode D'emploi

Реактив, представляющий собой положительный контроль
Для получения информации о сохранности нуклеиновых кислот в тканях, а также о возможности их достичь с помощью
зонда при исследовании срезов каждого образца, взятого у пациента, вместо РНК-зонда, предназначенного для испытаний,
используйте RNA Positive Control Probe PB0785, которая служит в качестве положительного контроля. Если RNA Positive
Control Probe (РНК-зонд, использующийся в качестве положительного контроля), демонстрирует неудовлетворительные
результаты с точки зрения положительного окрашивания, результаты исследования образцов следует считать недостоверными.
Ткань, полученная у пациента
Исследуйте образцы ткани, взятой у пациента и окрашенной с использованием РНК-зонда, предназначенного для испытаний,
в последнюю очередь. Интенсивность положительного окрашивания следует оценивать в контексте любого неспецифического
фонового окрашивания RNA Negative Control Probe PB0809 (РНК-зонда, являющегося отрицательным контролем PB0809).
Ожидаемые результаты
Нормальные ткани
При использовании PB0809 окрашивания не наблюдалось в широком диапазоне изучаемых тканей. (Общее число
исследованных нормальных тканей = 96).
Патологически измененные ткани
При использовании PB0809 не наблюдалось окрашивании опухолей яичников (0/3), опухолей щитовидной железы (0/3),
опухолей легких (0/3), опухолей печени (0/3), опухолей мозга (0/2), опухолей пищевода (0/2), опухолей молочной железы
(0/2), опухолей кожи (0/2), метастатических опухолей неизвестного происхождения (0/2), опухолей желудка (0/1), опухолей
толстого кишечника (0/1), опухолей прямой кишки (0/1), опухолей гортани (0/1) и опухоли вилочковой железы (0/1) (общее число
исследованных патологически измененных образцов = 29).
PB0809 рекомендован в качестве скринингового инструмента для оценки окрашивания зонда для испытуемого образца
РНК в образце пациента.
Ограничения, специфичные для этого продукта
Зонд RNA Negative Control Probe оптимизирован компанией Leica Biosystems для применения с реактивами Anti-Fluorescein
Antibody, BOND Polymer Refine Detection и дополнительными реактивами BOND. Пользователи, отклоняющиеся от
рекомендованных процедур анализа, должны брать на себя ответственность за интерпретацию результатов исследований
пациентов, выполненных в таких условиях. Продолжительность выполнения протокола может варьировать в зависимости от
варианта фиксации тканей и эффективности ферментативного расщепления и должна определяться эмпирически. В процессе
оптимизации условий демаскирования антигенов и продолжительности выполнения протокола должен использоваться RNA
Negative Control Probe (РНК-зонд, выполняющий функции отрицательного контроля).
Поиск и устранение неполадок
Источник (3) может помочь в принятии мер по устранению неполадок.
Обратитесь к местному дистрибьютору или в региональный офис компании Leica Biosystems, если в ходе работы
регистрируется необычное окрашивание (ткани, образца).
Дополнительная информация
Дополнительная информация, касающаяся проведения гибридизации in situ с использованием реактивов BOND, содержится
в рубриках «Принцип метода», «Необходимые материалы», «Подготовка образцов», «Контроль качества», «Проверка
достоверности анализа», «Интерпретация окрашивания», «Значения символов в маркировке продукции» и «Общие
ограничения» раздела «Применение реактивов BOND» в документации пользователя системы BOND.
Список источников
1. Pringle JH, Primrose L, Kind CN, et al. In situ hybridization demonstration of poly-adenylated RNA sequences in formalin-fixed
paraffin sections using a biotinylated oligonucleotide poly d(T) probe. Journal of Pathology. 1989;158(4):279—286.
2. Lewin B. Units of transcription and translation: the relationship between heterogeneous nuclear RNA and messenger RNA. Cell.
1975;4:11—20.
3. Clinical Laboratory Improvement Amendments of 1988, Final Rule 57 FR 7163 February 28, 1992.
4. Villanova PA. National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS). Protection of laboratory workers from infectious
diseases transmitted by blood and tissue; proposed guideline. 1991; 7(9). Order code M29-P.
5. Wilkinson DG. The theory and practice of in situ hybridization. In: Wilkinson DG. (ed.) In situ Hybridization A practical approach. 2
Edition. New York: Oxford University Press, 1998, pp.18—20.
Дата выпуска
26 Февраль 2020
nd
PB0809
Page 46