Leica BIOSYSTEMS BOND Ready-to-Use ISH Lambda Probe PB0669 Mode D'emploi page 46

• Pentru a obține o copie a fișei tehnice de securitate a materialului, luați legătura cu distribuitorul dvs. local sau cu biroul regional al
Leica Biosystems sau, ca alternativă, vizitați site-ul web al Leica Biosystems, www.LeicaBiosystems.com
• Specimenele, înainte și după fixare, precum și toate materialele expuse la acestea, trebuie manipulate ca și când ar avea potențialul
de a transmite infecții și trebuie eliminate luând măsurile de precauție adecvate
contactul reactivilor și probelor cu pielea și membranele mucoase. Dacă reactivii sau probele vin în contact cu suprafețele sensibile,
spălați cu apă din abundență. Solicitați asistență medicală.
• Consultați reglementările naționale, județene sau locale pentru informații privind eliminarea la deşeuri a oricăror componente cu
potențial toxic.
• Reduceți la minimum contaminarea microbiană a reactivilor, în caz contrar poate apărea o creștere a coloraţiei nespecifice.
• Timpii sau temperaturile de recuperare, incubaţie care diferă de valorile specificate pot genera rezultate eronate. Orice astfel de
modificare trebuie validată de către utilizator.
Instrucțiuni de utilizare
Lambda Probe a fost dezvoltată pentru utilizarea pe sistemul automat BOND (care include sistemul Leica BOND-MAX și sistemul Leica
BOND-III) în combinație cu Anti-Fluorescein Antibody și BOND Polymer Refine Detection. Protocolul de colorație recomandat pentru
Lambda Probe este ISH Protocol A. Se recomandă pretratarea enzimatică utilizând BOND Enzyme Pretreatment Kit, Enzyme 1, timp de
15 minute.
Trebuie utilizate întotdeauna țesuturi și reactivi de control corespunzători. Protocolul pentru țesuturile și reactivii de control trebuie să
corespundă cu cel al Lambda Probe.
Controlul calității
Diferențele în ceea ce privește procesarea țesutului și procedurile tehnice în laboratorul utilizatorului pot cauza o variabilitate
semnificativă a rezultatelor, necesitând efectuarea cu regularitate de controale interne, în plus față de următoarele proceduri.
Țesutul de control pozitiv
Folosit pentru a indica țesuturile pregătite corect și tehnicile de colorare adecvate.
O probă de țesut de control pozitiv trebuie să fie inclusă pentru fiecare set de condiții de testare în fiecare etapă de colorare. Un țesut cu
coloraţie pozitivă slabă este mai adecvat decât un țesut cu coloraţie pozitivă puternică în vederea unui control optim al calității și pentru a
detecta nivelurile minore de degradare a reactivului.
Țesutul de control negativ
Trebuie examinat după țesutul de control pozitiv pentru a verifica specificitatea informațiilor etichetării probei față de țintă.
Ca alternativă, varietatea de tipuri diferite de celule prezente în majoritatea secțiunilor tisulare oferă frecvent locuri de control negativ, dar
acest lucru trebuie verificat de către utilizator.
Reactivul de control negativ
Folosiți RNA Negative Control Probe PB0809 în locul Lambda Probe cu o secțiune din specimenul fiecărui pacient pentru a evalua
colorarea nespecifică și a permite o mai bună interpretare a colorării specifice la țintă.
Reactivul de control pozitiv
Folosiți RNA Positive Control Probe PB0785 în locul Lambda Probe cu o secțiune din specimenul fiecărui pacient pentru a furniza
informații despre conservarea acizilor nucleici în țesut precum și accesibilitatea acizilor nucleici pentru probă. Dacă RNA Positive Control
Probe nu demonstrează colorația pozitivă, rezultatele obținute cu specimenele testate trebuie considerate nevalide.
Țesutul pacientului
Examinați specimenele pacientului colorate cu Lambda Probe ultimele. Intensitatea coloraţiei pozitive trebuie evaluată în contextul
oricărei colorații de fundal nespecifice a RNA Negative Control Probe PB0809.
Rezultate așteptate
Țesuturi normale
PB0669 a detectat mRNA Lambda cu catenă ușoară în celule B în splină și amigdale, precum și ocazional celule B într-o varietate de
țesuturi care includ țesuturi mamare, de col uterin, hepatice, ale glandelor salivare, glandei parotide, intestinului subțire și intestinului
gros. Celulele B precursoare au fost de asemenea pozitive pentru Lambda mRNA în măduva osoasă. A fost de asemenea detectată o
colorare vagă suplimentară în celulele epiteliale ale tiroidei, prostatei, laringelui, esofagului, ale tubulelor renale, celulelor secretoare din
glandele suprarenale și celulele Leydig. (Numărul total al cazurilor normale evaluate = 109).
Țesuturi anormale
PB0669 a colorat 4/6 mieloame ale celulelor plasmatice. Nu s-a observat colorare la limfoame cu celule T (0/3), limfoame difuze cu
celule B mari (0/2), limfoame Hodgkin (0/2), un limfom Burkitt (0/1), tumori pulmonare (0/3), tumori ovariene (0/2), tumori hepatice (0/3),
tumori tiroidiene (0/2), tumori esofagiene (0/2), tumori mamare (0/2), tumori metastatice de origine necunoscută (0/2), tumori cerebrale
(0/2), tumori testiculare (0/2), tumori de piele (0/2), o tumoare de colon (0/1), o tumoare gastrică (0/1), o tumoare rectală (0/1), o tumoare
a laringelui (0/1) și o tumoare a timusului (0/1). (Numărul total al cazurilor anormale evaluate = 41).
PB0669 este recomandat pentru detectarea mRNA cu catenă ușoară Lambda.
Restricții specifice produsului
Lambda Probe a fost optimizată la Leica Biosystems pentru utilizarea cu Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer Refine Detection
și cu reactivii auxiliari BOND. Utilizatorii care se abat de la procedurile de testare recomandate trebuie să accepte responsabilitatea
pentru interpretarea rezultatelor pacientului în aceste circumstanțe. Timpii protocolului pot varia, datorită variației în fixarea țesutului
și eficacității digestiei enzimatice, și trebuie să fie determinați empiric. Atunci când se optimizează condițiile de recuperare și timpii
protocolului trebuie utilizată RNA Negative Control Probe.
PB0669
Page 45
. Nu pipetați niciodată reactivii cu gura și evitați
5