Leica DM R Serie Mode D'emploi page 318

Module à diaphragmes HC RF
Fluorescence avec module diaphragme HC RF:
Comme ici aucun filtre BG 38 n'est intégré, il doit
être monté au besoin dans le magasin de filtres
(65.13). Le blocage du trajet de rayons est ainsi
possible en partie en enlevant le module
d'ouverture.
Augmentation d'intensité par commutation
intermédiaire de
d'éclairage («Booster» sans fig.) possible.
Pièges de lumière
Remplacer éventuellement le condenseur par le
piège à lumière (fig. 64) afin d'éviter la lumière
parasite provenant de dessous la préparation.
En alternative: dans la platine plateau métallique
noir amovible.
Fig. 64 Piège de lumière pour la microscopie en fluorescence
(au lieu de mettre un condenseur). Au lieu du piège à lumière,
une bande de métal foncé ou plastique peut être utilisée qui
sera placée entre la partie inférieure et supérieure de la
platine mouvements croisés sous la préparation.
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la lunette d'approche
Erreurs possibles
Fluorescence faible, intensité faible:
Spécimen mal préparés, trop vieux ou délavés;
décoloration rapide des spécimen (FITC); trop
combinaison de filtres inadaptée; objectifs à
ouverture trop faible; grossissement des
oculaires trop fort; environnement trop clair.
Peu de contraste:
Bande d'excitation trop large; coloration non
spécifique; matière d'inclusion fluorescente;
fluorescence de l'objectif ou de l'huile.
En double fluorochromage, détails verts et
rouges visibles simultannément:
Blocs de filtres inadaptés aux observations
sélectives.
Illumination pas homogène:
Mauvais centrage
vacillante.
Le fond ressort, ou est rouge:
Le filtre d'atténuation anti-rouge n'est pas en
service.
Coloration de métaux
Pour des objets réfléchissants, comme par ex.
avec la technique Immuno-Gold (ISG), on
utilisera une observation polarisée en lumière
réfléchie à la place d'un bloc de filtres pour
fluorescence, le système de filtres POL
(polariseurs croisés
contraste) et avec le diaphragme d'ouverture,
on pourra influencer les paramètres suivants:
contraste, pouvoir de résolution et profondeur
de champ.
de lampe, ou lampe
afin d'accroître le