Leica BIOSYSTEMS NCL-g-SARC Mode D'emploi page 82

Novocastra Lyofilizovaná myší monoklonální protilátka
™
Gamma-Sarcoglycan
Kód výrobku: NCL-g-SARC
Zamýšlené použití
Pro diagnostické použití in vitro.
NCL-g-SARC je určen k imunohistochemickému kvalitativnímu stanovení gama-sarkoglykanu světelnou mikroskopií. Klinickou
interpretaci jakéhokoliv barvení nebo jeho nepřítomnosti je nutné doplnit morfologickým vyšetřením s použitím správných kontrol a
zhodnotit je musí kvalifikovaný patolog v kontextu s klinickou anamnézou pacienta a jinými diagnostickými testy.
Princip metody
Imunohistochemické (IHC) barvicí techniky umožňují vizualizaci antigenů pomocí sekvenční aplikace specifické protilátky proti
antigenu (primární protilátka), sekundární protilátky proti primární protilátce a enzymového komplexu s chromogenním substrátem s
interponovanými omývacími kroky. Enzymatická aktivace chromogenu má za následek viditelnou reakci produktu v místě antigenu.
Vzorek pak může být kontrastně nabarven a překryt krycím sklíčkem. Výsledky se interpretují ve světelném mikroskopu; jsou pomůckou
v diferenciální diagnostice patofyziologických procesů, které mohou, ale nemusí, souviset s příslušným antigenem.
Klon
35DAG/21B5
Imunogen
Syntetický peptid obsahující aminokyseliny 167–178 sekvence králičího gama-sarkoglykanu (Noguchi et al., 1995).
Specificita
Lidský gama-sarkoglykan (35 kD).
Složení reagencie
NCL-g-SARC je lyofilizovaný supernatant z tkáňové kultury obsahující jako konzervační prostředek roztok azidu sodného. Uživatel musí
obsah lahvičky rekonstituovat správným objemem sterilní destilované vody, jak je uvedeno na štítku na lahvičce.
Třída Ig
IgG2b, kappa
Koncentrace celkového proteinu
Koncentrace celkového proteinu specifická pro šarži je uvedena na štítku na lahvičce.
Koncentrace protilátek
22,5 mg/l nebo vyšší, stanovená metodou ELISA. Koncentrace imunoglobulinu (Ig) specifická pro šarži je uvedena na štítku na lahvičce.
Doporučení k použití
Imunohistochemické vyšetření (viz Metodika) na zmrazených řezech. Doporučené ředění: 1:100 po dobu 60 minut při 25
doporučení je uvedeno jako vodítko; uživatelé musí stanovit vlastní optimální pracovní ředění.
Skladování a stabilita
Neotevřené protilátky skladujte při teplotě 2–8
použitelnosti uvedené na štítku na lahvičce. Nepoužívejte po uplynutí data exspirace uvedeného na štítku na lahvičce. Pokud jsou
rekonstituované protilátky skladovány při teplotě 2–8
aby byly alikvoty rekonstituovaných protilátek uchovávány zmrazené při teplotě -20
Je nutno zabránit opakovanému zmrazování a rozmrazování. Pracovní roztok připravte ve dnu použití. Okamžitě po použití vraťte do
teploty 2–8 C. Podmínky skladování jiné než výše uvedené musí uživatel validovat.
°
Příprava vzorku
Tkáňové bloky ze vzorku zmrazte v isopentanu chlazeném tekutým dusíkem (viz Varování a bezpečnostní opatření). Vzorky nevyžadují
další fixaci, ale měly by být zality směsí OCT
G-SARC-CE
Page 81
Total Protein
C. Za těchto podmínek nedojde k významnému snížení funkčnosti produktu až do doby
o
C, jsou stabilní nejméně dva měsíce. Při dlouhodobém skladování se doporučuje,
o
(Sakura, produkt č. Tissue-Tek 4583).
™
C (nedoporučují se beznámrazové mrazicí boxy).
o
C. Toto
o