Leica BIOSYSTEMS NCL-g-SARC Mode D'emploi page 17

Novocastra Lyophilisierter Monoklonaler Maus-Antikörper
TM
Gamma-Sarcoglycan
Produkt-Nr.: NCL-g-SARC
Verwendungszweck
Für in-vitro-Diagnostik.
NCL-g-SARC ist für den qualitativen Nachweis von Gamma-Sarkoglykan mittels Lichtmikroskopie und Immunhistochemie vorgesehen.
Die klinische Bewertung einer vorliegenden bzw. fehlenden Färbung sollte durch morphologische Studien mit entsprechenden Kontrollen
ergänzt und im Kontext der Krankengeschichte des Patienten und anderer diagnostischer Tests von einem qualifizierten Pathologen
vorgenommen werden.
Verfahrensgrundlage
Immunhistochemische (IHC) Färbetechniken gestatten die optische Darstellung von Antigenen mittels sequentieller Anwendung
eines spezifischen Antikörpers zum Antigen (primärer Antikörper), eines sekundären Antikörpers zum primären Antikörper und eines
Enzymkomplexes mit einem chromogenen Substrat, jeweils getrennt durch dazwischen liegende Waschschritte. Die enzymatische
Aktivierung des Chromogens führt zu einem sichtbaren Reaktionsprodukt am Ort des Antigens. Die Probe kann dann gegengefärbt
und mit einem Deckglas versehen werden. Die Ergebnisse werden mithilfe eines Lichtmikroskops interpretiert und unterstützen die
Differentialdiagnose pathophysiologischer Prozesse, die mit einem bestimmten Antigen assoziiert sein könnten.
Klon
35DAG/21B5
Immunogen
Synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 167–178 der gamma-Sarkoglykan-Sequenz des Kaninchens enthält (Noguchi et al., 1995).
Spezifität
Humanes gamma-Sarkoglykan (35 kDa).
Reagenzzusammensetzung
NCL-g-SARC ist ein lyophilisierter Gewebekulturüberstand, der Natriumazid als Konservierungsmittel enthält. Der Benutzer muss den
Inhalt des Fläschchens mit dem korrekten Volumen sterilen, destillierten Wassers entsprechend den Angaben auf dem Produktetikett
rekonstituieren.
Ig-Klasse
Kappa-IgG2b
Gesamtproteinkonzentration
Total Protein
Siehe Angaben auf dem Produktetikett bezüglich der chargenspezifischen Gesamtproteinkonzentration.
Antikörperkonzentration
Größer als oder gleich 22,5 mg/l laut ELISA-Bestimmung. Hinsichtlich der chargenspezifischen Ig-Konzentration siehe Angaben auf dem
Produktetikett.
Gebrauchsempfehlungen
Immunhistochemie (siehe Vorgehensweise) auf gefrorenen Schnitten. Empfohlene Verdünnung: 1:100 über einen Zeitraum von 60
minuten bei 25 C. Dies ist nur eine Empfehlung, und die Benutzer sollten ihre eigenen optimalen Arbeitsverdünnungen bestimmen.
o
Lagerung und Stabilität
Ungeöffneten Antikörper bei 2–8 C lagern. Unter diesen Bedingungen kommt es bis zum Ablauf des auf dem Produktetikett
o
angegebenen Verfallsdatums zu keiner bedeutenden Verschlechterung der Produktleistung. Nach Ablauf des Verfallsdatums (auf dem
Behälteretikett) darf das Produkt nicht mehr verwendet werden. Der rekonstituierte Antikörper bleibt bei einer Lagertemperatur von
2–8 C mindestens zwei Monate lang stabil. Für eine langfristige Lagerung wird empfohlen, Aliquoten des rekonstituierten Antikörpers
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bei -20 C einzufrieren (frostfreie Gefrierschränke werden nicht empfohlen). Wiederholtes Einfrieren und Auftauen muss vermieden
o
werden. Die Arbeitsverdünnungen müssen am Tag ihrer Verwendung angesetzt werden. Nach Gebrauch sofort wieder bei 2–8 C lagern.
o
Lagerbedingungen, die von den oben genannten Bedingungen abweichen, müssen vom Benutzer verifiziert werden.
Probenvorbereitung
Die Blöcke mit den Gewebeproben müssen in Isopentan, das in flüssigem Stickstoff gekühlt wurde, eingefroren werden (siehe
Warnhinweise und Sicherheitsmaßnahmen). Die Proben erfordern keine weitere Fixierung, sollten jedoch in OCT -Compound (Sakura,
™
Produkt-Nr. Tissue-Tek 4583) eingebettet werden.
G-SARC-CE
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