Leica BIOSYSTEMS NCL-g-SARC Mode D'emploi page 7

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Novocastra
Anticorps Monoclonal Lyophilisé de Souris
TM
Gamma-Sarcoglycan
Référence du Produit: NCL-g-SARC
Utilisation Prévue
Diagnostic in vitro.
Le NCL-g-SARC est destiné à l'identification qualitative par microscopie optique du gamma-sarcoglycane par immunohistochimie.
L'interprétation clinique de tout marquage, ou absence de marquage, doit être complétée par des études morphologiques utilisant
des contrôles appropriés et doit être évaluée par un pathologiste qualifié à la lumière des antécédents cliniques du patient et d'autres
analyses diagnostiques.
Principe de la Procédure
Les techniques de marquage immunohistochimique (IHC) permettent la visualisation des antigènes via l'application séquentielle
d'un anticorps spécifique sur un antigène (anticorps primaire), d'un anticorps secondaire sur l'anticorps primaire et d'un complexe
enzymatique comportant un substrat chromogène, avec des étapes de lavage intercalées. L'activation enzymatique du chromogène
se traduit par la présence d'un produit de réaction visible au niveau du site de l'antigène. Le spécimen peut ensuite faire l'objet d'une
coloration de contraste et être placé sous une lamelle. Les résultats sont interprétés à l'aide d'un microscope optique et participent au
diagnostic différentiel des processus physiopathologiques, susceptibles, ou non, d'être associés à un antigène particulier.
Clone
35DAG/21B5
Immunogène
Peptide synthétique contenant les acides aminés 167–178 de la séquence de la gamma-sarcoglycane de lapin (Noguchi et al., 1995).
Spécificité
Gamma-sarcoglycane humaine (35 kD).
Composition du Réactif
Le NCL-g-SARC est un surnageant de culture tissulaire lyophilisé contenant une solution d'azide de sodium comme conservateur.
L'utilisateur doit reconstituer le contenu du flacon avec un volume correct d'eau distillée stérile comme indiqué sur l'étiquette du flacon.
Classe d'Ig
IgG2b, kappa
Concentration Totale en Protéines
Total Protein
La concentration totale en protéines, spécifique du lot, figure sur l'étiquette du flacon.
Concentration en Anticorps
Supérieure ou égale à 22,5 mg/l, déterminée par la méthode ELISA. La concentration totale en Ig, spécifique du lot, figure sur l'étiquette
du flacon.
Recommandations d'utilisation
Immunohistochimie (voir Méthodologie) sur des coupes congelées. Dilution préconisée: 1:100 pendant 60 minutes à 25
C. Ceci n'est
o
donné qu'à titre indicatif et les utilisateurs doivent déterminer leurs propres dilutions de travail optimales.
Conservation et Stabilité
Conserver l'anticorps non ouvert à 2–8
C. Dans ces conditions il n'y a pas de perte de performance significative du produit jusqu'à la
o
date de péremption qui figure sur l'étiquette du flacon. Ne pas utiliser après la date de péremption indiquée sur l'étiquette du récipient.
L'anticorps reconstitué est stable pendant au moins deux mois s'il a été conservé à 2–8
C. Pour une conservation à long terme,
o
il est recommandé de congeler les aliquotes d'anticorps à -20
C (l'utilisation de congélateurs à dégivrage automatique n'est pas
o
conseillée). Ne pas congeler et décongeler de façon répétée. Préparer les dilutions de travail le jour même de leur utilisation. Remettre
immédiatement à 2–8
C après utilisation. Les conditions de conservation autres que celles qui sont spécifiées ci-dessus doivent faire
o
l'objet d'une vérification par l'utilisateur.
Préparation des Spécimens
Congeler les blocs tissulaires dans de l'isopentane refroidi dans de l'azote liquide (voir Mises en garde et précautions). Les spécimensne
nécessitent pas d'autre fixation mais doivent être inclus dans le composé OCT
(Sakura, réf. produit Tissue-Tek 4583).
G-SARC-CE
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