Table des Matières
Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
Metodologie de imunohistochimie pentru utilizarea anticorpilor
Novocastra
pe țesut muscular congelat.
TM
Reactivi necesari care nu sunt însă furnizați
1.
Solvenți standard folosiți în imunohistochimie.
2.
soluție salină tamponată cu trometamină (SSTT) 50 mM, pH 7,6.
3.
Diluant anticorp - ser normal optim diluat în SSTT.
4.
Ser normal de la speciile în care a fost crescut anticorpul secundar.
5.
Anticorp secundar conjugat cu peroxidază - utilizați conform recomandărilor producătorului.
6.
3,3' tetrahidroclorură de diaminobenzidină (DAB) - a se prepara și utiliza conform recomandărilor producătorului.
7.
Mediu de montare - a se utiliza conform recomandărilor producătorului.
Echipamente necesare care nu sunt însă furnizate
1.
Incubator setat la 25
C.
o
2.
Echipament de laborator general pentru imunohistochimie.
3.
Ventilator electric pentru uscarea la aer a lamelor.
Soluții de recuperare a antigenului (consultați Recomandări de utilizare)
Nu este cazul pentru secțiunile congelate.
Metodologie
Înainte de a aplica această metodologie, utilizatorii trebuie să fie instruiți în ceea ce privește tehnicile imunohistochimice.
Utilizatorii trebuie să stabilească diluțiile optime în funcție de anticorpi. Dacă nu se indică altfel, toate etapele se efectuează la 25
1.
Tăiați și montați secțiuni de 4–10 µm pe lamele acoperite cu un adeziv tisular adecvat și uscați la aer timp de cel puțin o oră.
2.
Incubați secțiunile cu anticorp primar diluat optim (a se vedea Recomandări de utilizare).
3.
Spălați în soluție tampon SSTT timp de 2 x 5 minute, înclinându-le ușor de-o parte și de cealaltă.
4.
Incubați secțiunile în anticorpul secundar conjugat cu peroxidază adecvat.
5.
Spălați în soluție tampon SSTT timp de 2 x 5 minute, înclinându-le ușor de-o parte și de cealaltă.
6.
Incubați lamele în DAB.
7.
Clătiți lamele în apă curată.
8.
Deshidratați, curățați și montați secțiunile.
Amendamente la ediția anterioară
.
Nu este cazul
Data publicării
4 februarie 2008 (CEprotocol/Mușchi congelat).
G-SARC-CE
Page 67
C.
o
Publicité
Table des Matières
