Nota: Según la unidad de calentamiento, espere aproximadamente 30 minutos para que el Bloque de Calor para el
Sistema de Detección Molecular 3M alcance la temperatura deseada. Con un termómetro calibrado apropiado (p. ej.,
un termómetro de inmersión parcial o un termómetro digital termopar, no un termómetro de inmersión total) colocado
en la ubicación designada, verifique que el Bloque de Calor para el Sistema de Detección Molecular 3M se encuentre a
100 ± 1 °C.
Preparación del Equipo de Detección Molecular 3M™
1. Inicie el Software de Detección Molecular 3M™ e inicie sesión. Comuníquese con su representante de 3M Food Safety
para asegurarse de tener la versión más actualizada del software.
2. Encienda el Equipo de Detección Molecular 3M.
3. Cree o edite una corrida con datos para cada muestra. Para obtener detalles, consulte el Manual del Usuario del
Sistema de Detección Molecular 3M.
Nota: El Equipo de Detección Molecular 3M debe alcanzar y mantener una temperatura de 60 °C antes de insertar
la Bandeja de Carga Rápida para el Sistema de Detección Molecular 3M con los tubos de reacción. Este paso de
calentamiento lleva unos 20 minutos y aparece indicado por una luz de color ANARANJADO en la barra de estado del
equipo. Una vez que el equipo esté listo para iniciar una corrida, la barra de estado se cambiará a color VERDE.
Lisis
1. Permita que los tubos de Solución para la Lisis (LS) se calienten colocando la gradilla a temperatura ambiente (20 a 25 °C)
durante la noche (16 a 18 horas). Las alternativas para que los tubos de LS alcancen temperatura ambiente son colocar los
tubos LS sobre el banco de laboratorio durante por lo menos 2 horas, incubar los tubos LS en una incubadora a 37 ± 1 °C
durante 1 hora o colocarlos en una unidad de calentamiento de dos bloques durante 30 a 100 °C.
2. Invierta los tubos tapados para mezclarlos. En un plazo de 4 horas, proceda al paso siguiente.
3. Retire el Caldo de enriquecimiento de la incubadora.
4. Se requiere utilizar un tubo de LS para cada muestra y la muestra de Control Negativo (NC) (medio de
enriquecimiento estéril).
4.1 Las tiras de tubos de LS pueden cortarse para obtener la cantidad de tubos de LS deseada. Seleccione la cantidad
de tubos de LS individuales o de tiras de 8 tubos necesarias. Coloque los tubos de LS en una gradilla vacía.
4.2 Para evitar la contaminación cruzada, destape una tira de tubos de LS por vez y use una nueva punta de pipeta para
cada paso de transferencia.
4.3 Transfiera la muestra enriquecida a los tubos de LS como se describe a continuación:
Primero, transfiera cada muestra enriquecida a un tubo de LS. Transfiera el NC al final.
4.4 Utilice la Herramienta para Encapuchado/Desencapuchado del Sistema de Detección Molecular - Lisis 3M™ para
destapar una tira de tubos de LS, una tira por vez.
4.5 Deseche la tapa del tubo de LS; si se conservará el lisado para una repetición de prueba, coloque las tapas en un
envase limpio para su reaplicación luego de la lisis. Para procesar el lisado conservado, consulte el Apéndice A.
4.6 Transfiera 20 µl de la muestra a un tubo de LS a menos que se indique algo diferente en las tablas de protocolo 2,
3, o 4.
5. Repita el paso 4.2 hasta que cada muestra individual se haya agregado al correspondiente tubo de LS de la tira.
6. Repita los pasos 4.1 a 4.6 según sea necesario para la cantidad de muestras que se deben analizar.
7. Cuando ya haya transferido todas las muestras, transfiera 20 µl de NC (medio de enriquecimiento estéril, p. ej., Caldo
Demi-Fraser) a un tubo de LS. No use agua como un NC.
8. Verifique que la temperatura del Bloque de Calor para el Sistema de Detección Molecular 3M sea de 100 ±1 °C.
9
(Español)
ES
20 µl