5.1 Перенесите 20 мкл лизата пробы из верхней половины жидкости (не торопитесь) в пробирке с
раствором для лизиса в соответствующую пробирку с реагентом. Переносить лизат в пробирку
следует под определенным углом, чтобы не потревожить осадок. Перемешайте лизат в
пробирке с помощью пипетки (наберите и выпустите жидкость из пипетки 5 раз).
5.2 Повторяйте шаг 5.1 до тех пор, пока лизат избранной пробы не будет перенесен в соответствующую
пробирку с реагентами на пластинке.
5.3 Закройте пробирки для реагента с помощью предоставленных дополнительных колпачков и
используйте закругленную сторону инструмента 3M для запечатывания/распечатывания пробирок для
подачи давления движением туда и обратно, чтобы узнать, хорошо ли закрыты пробирки.
5.4 Повторите шаг 5.1 столько раз, сколько проб необходимо исследовать.
5.5 После переноса лизатов всех проб в соответствующие пробирки повторите шаг 5.1, чтобы перенести
20 мкл лизата отрицательного контроля в пробирку с реагентом.
5.6 Перенесите 20 мкл лизата отрицательного контроля в пробирку с контролем реагентов.
Переносить лизат в пробирку следует под определенным углом, чтобы не потревожить осадок.
Перемешайте лизат в пробирке с помощью пипетки (наберите и выпустите жидкость из пипетки 5 раз).
6. Загрузите запечатанные пробирки в чистый продезинфицированный лоток быстрой загрузки
для молекулярной диагностики 3M. Закройте и зафиксируйте крышку лотка быстрой загрузки для
молекулярной диагностики 3M.
7. Проверьте параметры настройки цикла в программном обеспечении для молекулярной диагностики 3M.
8. Нажмите кнопку Start (Запуск) в программном обеспечении. Крышка выбранного прибора откроется
автоматически.
9. Поместите лоток быстрой загрузки для молекулярной диагностики 3M в прибор для молекулярной
диагностики 3M и закройте крышку, чтобы начать анализ. Результаты появятся в течение 75 минут, хотя
положительные результаты могут быть определены быстрее.
10. По окончании анализа извлеките лоток быстрой загрузки для молекулярной диагностики 3M из прибора
для молекулярной диагностики 3M и поместите пробирки в раствор бытового отбеливателя (1–5 % в
объемном отношении с водой) на 1 час вдали от зоны проведения анализа.
УВЕДОМЛЕНИЕ. Для минимизации риска получения ложноположительных результатов вследствие
вторичного загрязнения ни в коем случае не следует открывать пробирки с реагентами, содержащие
амплифицированную ДНК. В число таких пробирок входят пробирки с контролем реагентов, реагентами
проб и контролем матрицы. Запечатанные пробирки с реагентами следует выдерживать в растворе
бытового отбеливателя (1–5 % в объемном отношении с водой) в течение 1 часа вдали от зоны
проведения анализа.
Результаты анализа и их интерпретация
Специальный алгоритм интерпретирует кривую световой отдачи, построенную в результате выявления
амплификации нуклеотидных последовательностей. Программное обеспечение автоматически
анализирует полученные данные и снабжает их цветовыми кодами. Анализ уникальных параметров кривой
позволяет получить положительный или отрицательный результат. Результаты, которые можно считать
положительными, сообщаются исследователю в реальном времени; отрицательные результаты и данные,
требующие изучения, отображаются по окончании цикла.
Результаты, которые можно считать положительными, следует подтверждать в соответствии со
стандартными лабораторными процедурами или в соответствии с подходящим стандартным методом
начиная с переноса из первичной среды обогащения во вторичный обогатительный бульон с последующим
культивированием и подтверждением изолятов с использованием соответствующих биохимических и
серологических методов.
В рамках ОЦЕНКИ NF все пробы, которые определяются как положительные с помощью 3M Молекулярного
анализа 2 – Listeria monocytogenes, должны быть подтверждены следующими тестами:
20 µL
11
RU
(Русский)
(1, 2, 3)
,