样品培养
表 2、 3 或 4 提供了针对食品和环境样品的培养指导。 用户有责任验证备用取样方案或稀释率, 以确保本检测方法符合用户的
标准。
食品
1. 将半 Fraser 肉汤培养基 (包括柠檬酸铁铵) 平衡到实验室环境温度。
2. 根据表 2、 3 或 4 在无菌环境下将增菌培养基和样品混合起来。 对于所有肉类和微粒样品, 建议使用滤器包。
3. 采用混合、 均质操作或手动混合方法进行彻底的混匀操作 2 ± 0.2 分钟。 根据表 2、 3 或 4 在 37 ±1°C 环境下进行培养。
4. 如果要求 (见表 2、 3 和 4) , 将 0.1 mL 初始增菌培养基转移到 10 mL 的 Fraser 肉汤中。 在 37 ±1 ℃ 下培养 20-24 小时
环境样品
样品采集设备可以是一块浸有中和溶液以消除消毒剂影响的海绵。 3M 建议使用无菌纤维素海绵。 Dey-Engley (D/E) 中和肉汤或
李氏肉汤。 建议在取样后对区域消毒。
警告: 如果您选择使用含芳基磺化复合物的中和缓冲液 (NB) 作为海绵的水合溶液, 则必须在检测之前按 1:2 的比例稀释 (1 份
样品混入 1 份无菌培养基中) 增菌环境样品, 以便降低因释放带有污染物的产品而导致假阴性结果的相关风险。
验证表面上是否存在病菌的建议取样区大小为至少 100 cm
个区域 (先从左到右, 然后从上到下) , 或者按照您当前的取样方案或依照 FDA BAM
集环境样品。
1. 将半 Fraser 肉汤培养基 (包括柠檬酸铁铵) 平衡到实验室环境温度。
2. 根据表 2、 3 或 4 在无菌环境下将增菌培养基和样品混合起来。
3. 采用混合、 均质操作或手动混合方法进行彻底的混匀操作 2 ± 0.2 分钟。 根据表 2、 3 或 4 在 37 ±1°C 环境下培养 24-30 小时。
表 2: 使用半 Fraser 肉汤和 Fraser 肉汤培养基在 37 ±1°C 下实施的一般培养方案 (根据需要) 。
样品基质
经过热处理、 烹调、 腌制的
肉类、 家禽肉、 海产品和鱼
经过热处理/巴氏消毒的
乳制品
农产品和蔬菜
多成分食品
环境样品
(a)
生肉、 家禽肉、 海产品和鱼
样品基质
原料乳制品
(a) 转移至裂解 (LS) 管的样品量。 请参阅 "裂解" 部分的步骤 4.6。
在 AOAC OMA 和 PTM 研究中, 已发现 3M 单核细胞增生李斯特菌分子检测分析 2 – 单核细胞增生李斯特菌 是检测 李斯特菌菌
落的有效方法。 研究中检测的数据矩阵见表 3 所示。
样品大小
培养肉汤量 (mL) 培养时间 (小时)
25 g
225
1 块海绵
100 或 225
1 个药签
10
25 g
475
初步增菌
(半 Fraser 肉汤)
样品大小
培养肉汤量 (mL) 培养时间 (小时)
25 g
225
已验证方法的具体说明
官方方法
AOAC
®
AOAC 性能测试方法
(10 cm x 10 cm 或 4" x4" ) 。 当使用海绵取样时, 按两个方向覆盖整
2
、 USDA FSIS MLG
(1)
24-30
24-30
24-30
28-32
样品大小
将 0.1 mL 移
20-24
至 10 mL 的
Fraser 肉汤
2016.08
SM
# 081501
SM
4
(简体中文)
ZH
或 ISO 18593
准则收
(2)
(7)
二次增菌
(Fraser 肉汤) 样品分析量
培养时间 (小时)
20-24
10 μL
(a)