3M MDA2LMO96 Mode D'emploi page 130

Obs.: Dependendo da unidade de aquecimento, aguarde aproximadamente 30 minutos até que o 3M Bloco de
Aquecimento para Detecção Molecular alcance a temperatura. Utilizando um termômetro calibrado adequado (por
exemplo, um termômetro de imersão parcial ou um termômetro digital de termopares, e não um termômetro de imersão
total) colocado no local designado, verifique se o 3M Bloco de Aquecimento para Detecção Molecular está a 100 ± 1°C.
Preparação do 3M™ Equipamento de Detecção Molecular
1. Inicie o Software 3M™ do Sistema de Detecção Molecular e efetue login. Entre em contato com seu representante da
3M Food Safety para garantir que você está com a versão mais atualizada do software.
2. Ligue o 3M Equipamento de Detecção Molecular.
3. Crie ou edite uma execução com dados para cada amostra. Consulte o Manual do Usuário do 3M Sistema de Detecção
Molecular para obter mais detalhes.
Obs.: O 3M Equipamento de Detecção Molecular deve atingir e manter a temperatura de 60°C antes de inserir a
3M Bandeja de Carga Rápida para Detecção Molecular com os tubos de reação. Esta etapa de aquecimento leva
aproximadamente 20 minutos e é indicada por uma luz LARANJA na barra de status do equipamento. Quando o
equipamento estiver pronto para iniciar uma execução, a barra de status ficará VERDE.
Lise
1. Deixe os tubos da solução de lise (LS) aquecerem configurando o suporte à temperatura ambiente (de 20 a 25°C)
durante a noite (de 16 a 18 horas). Alternativas para equilibrar os tubos LS à temperatura ambiente são posicionar os
tubos LS na bancada do laboratório durante pelo menos 2 horas, incubar os tubos LS em uma incubadora de 37 ± 1°C
por 1 hora ou colocá-los em um aquecedor de bloqueio duplo seco por 30 segundos a 100°C.
2. Inverta os tubos tampados para misturar. Passe para o próximo passo em até 4 horas
3. Remova o caldo de enriquecimento da incubadora.
4. É necessário um tubo LS para cada amostra e a amostra de controle negativo (CN) (meio de enriquecimento estéril).
4.1 Podem ser cortadas tiras para tubos LS de acordo com o número de tubos LS. Selecione o número de tiras
individuais e para conjunto de 8 tubos necessárias para os tubos LS. Coloque os tubos LS em uma prateleira vazia.
4.2 Para evitar contaminação, destampe uma tira de tubo LS de cada vez e utilize um novo ponteiro de pipeta para
cada etapa da transferência.
4.3 Transfira a amostra enriquecida para os tubos LS conforme descrito abaixo:
Primeiro transfira cada amostra enriquecida para tubos LS individuais. Por último, transfira o CN.
4.4 Utilize a 3M™ Ferramenta de Tampar/Destampar para Detecção Molecular - Lise para destampar uma tira de tubo
LS – uma tira de cada vez.
4.5 Descarte a tampa do tubo LS – se o lisado for mantido para novo teste, coloque as tampas em um recipiente limpo
para reutilização após a lise. Para processamento do lisado mantido, consulte o Apêndice A.
4.6 Transfira 20 uL de amostra para um tubo LS, a menos que indicado de outra forma nas Tabelas 2, 3 e 4 do protocolo.
5. Repita a etapa 4.2 até que todas as amostras individuais tenham sido adicionadas a um tubo LS correspondente na tira.
6. Repita as etapas 4.1 a 4,6, conforme necessário, para o número de amostras a serem testadas.
7. Quando todas as amostras tiverem sido transferidas, transfira 20 ul de CN (meio de enriquecimento estéril, por
exemplo, caldo Demi-Fraser) para um tubo LS. Não utilize água como CN.
8. Verifique se a temperatura do 3M Bloco de Aquecimento para Detecção Molecular está a 100 ± 1°C.
9. Coloque a prateleira descoberta de tubos LS no 3M Bloco de Aquecimento para Detecção Molecular e aqueça por
15 ± 1 minutos. Durante o aquecimento, a solução LS irá mudar de cor de rosa (frio) para amarelo (quente).
Amostras que não foram tratadas com aquecimento de forma adequada durante a etapa lise do ensaio podem ser
consideradas um risco biológico potencial e NÃO devem ser inseridas no 3M Equipamento de Detecção Molecular.
PT
8
(Português)
20 µl