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3M MDA2LMO96 Mode D'emploi page 21

Kit de détection moléculaire listeria monocytogenes

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Remarque : selon l'unité de traitement thermique utilisée, le Support de bloc chauffant pour système de détection
moléculaire 3M atteint la température souhaitée en 30 minutes environ. Utiliser un thermomètre étalonné adapté (par
ex., un thermomètre à immersion partielle ou un thermomètre à thermocouple numérique, et non un thermomètre à
immersion totale) placé à l'endroit indiqué du Support de bloc chauffant pour système de détection moléculaire 3M afin
de vérifier que sa température est de 100 ± 1 °C.
Préparation de l'Instrument de détection moléculaire 3M™
1. Lancer le Logiciel de détection moléculaire 3M™ et ouvrir une session. Contactez votre représentant 3M en produits de
microbiologie pour vous assurer que vous disposez de la dernière version du logiciel.
2. Mettre l'Instrument de détection moléculaire 3M sous tension.
3. Créer ou modifier une analyse en saisissant les données pour chaque échantillon. Pour plus de détails, consulter le
manuel d'utilisation du Système de détection moléculaire 3M.
Remarque : REMARQUE : l'Instrument de détection moléculaire 3M doit être porté et maintenu à une température
de 60 °C avant l'insertion du Plateau de chargement rapide pour système de détection moléculaire 3M, dans lequel
sont placés les tubes de réactif. Cette étape de chauffage prend environ 20 minutes ; pendant ce processus, un voyant
lumineux ORANGE s'allume sur la barre d'état de l'instrument. Lorsque l'instrument est prêt pour l'analyse, la barre d'état
devient VERTE.
Lyse
1. Laisser les tubes de solution de lyse (LS) se réchauffer en plaçant le support à température ambiante (20-25 °C)
pendant une nuit (16-18 heures). Il est également possible d'amener les tubes de LS à température ambiante en les
plaçant sur le plan de travail du laboratoire pendant au moins 2 heures, en incubant les tubes de LS dans un incubateur
à 37 ± 1 °C pendant 1 heure ou en les plaçant dans une unité de traitement thermique à sec double bloc pendant
30 secondes à 100 °C.
2. Retourner les tubes recouverts d'un bouchon afin de mélanger, jusqu'à 4 heures avant utilisation.
3. Retirer le bouillon d'enrichissement de l'incubateur.
4. Il est nécessaire d'utiliser un tube de LS pour chaque échantillon et pour l'échantillon témoin négatif (NC) (milieu
d'enrichissement stérile).
4.1 Les barrettes de tubes de LS peuvent être coupées de manière à obtenir le nombre de tubes de LS souhaité.
Sélectionner le nombre de tubes de LS individuels ou de barrettes de 8 tubes nécessaire. Placer les tubes de LS
dans un portoir vide.
4.2 Pour éviter toute contamination croisée, ouvrir les barrettes de tubes de LS une à une et utiliser un nouvel embout
de pipette pour chaque étape de transfert.
4.3 Transférer l'échantillon enrichi dans les tubes de LS comme indiqué ci-dessous :
Transférer tout d'abord chaque échantillon enrichi dans des tubes de LS individuels. Transférer le NC en dernier.
4.4 Ouvrir les barrettes de tubes de LS une à une à l'aide de l'Outil d'ouverture/fermeture pour système de détection
moléculaire 3M™ – Lyse.
4.5 Jeter le bouchon du tube de LS. Si le lysat doit être soumis à un nouveau test ; placer les bouchons dans un
récipient propre pour réapplication après la lyse. Pour le traitement du lysat conservé, voir l'annexe A.
4.6 Transférer 20 µl d'échantillon dans un tube de LS sauf indication contraire mentionnée dans les tableaux de
protocole 2, 3 ou 4.
5. Répéter l'étape 4.2 jusqu'à ce que chaque échantillon individuel ait été ajouté au tube de LS correspondant dans la
barrette.
6. Reprendre les étapes 4.1 à 4.6 au besoin, en fonction du nombre d'échantillons à tester.
7. Une fois tous les échantillons transférés, transférer 20 µl de NC (milieu d'enrichissement stérile, p. ex. Bouillon demi-
Fraser) dans un tube de LS. Ne pas utiliser d'eau comme NC.
8. Vérifier que la température du Support de bloc chauffant pour système de détection moléculaire 3M est de 100 ±1 °C.
9
(Français)
FR
20 µl

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