Not: Reaksiyon tüpleri ile birlikte 3M Moleküler Tayin Hızlı Yükleyici Tepsisi'ni yerleştirmeden önce, 3M Moleküler Tayin
Cihazı 60°C sıcaklığa ulaşmalı ve bu sıcaklığı korumalıdır. Bu ısınma aşaması yaklaşık 20 dakika sürer ve cihazın durum
çubuğunda TURUNCU bir ışıkla gösterilir. Cihaz bir testi başlatmaya hazır olduğunda, durum çubuğu YEŞİL renge döner.
LİZİS
1. Rafı, bir gece boyunca (16-18 saat) ortam sıcaklığına (20-25 °C) ayarlayarak lizis solüsyonu (LS) tüplerinin ısınmasını
sağlayın. LS tüplerini ortam sıcaklığına getirmek için alternatifler, LS tüplerini en az 2 saat laboratuvar tezgahına
koymak, LS tüplerini 1 saatliğine 37 ± 1°C'de inkübe etmek veya kuru çift bloklu bir ısıtıcıya 100°C'de 30 saniyeliğine
yerleştirmektir.
2. Kapağı takılmış tüpleri karışmaları için ters çevirin. 4 saat içinde bir sonraki adıma geçin.
3. Enkübatörden zenginleştirme besiyerini çıkarın.
4. Her numune ve Negatif Kontrol (NC) (steril zenginleştirme ortamı) numunesi için bir LS tüpü gereklidir.
4.1 LS tüpü stripleri, istenen LS tüpü sayısıyla sınırlanabilir. İhtiyaç duyulan sayıda bağımsız LS tüpü veya 8 tüplük strip
seçin. LS tüplerini boş bir rafa yerleştirin.
4.2 Çapraz kontaminasyonu önlemek için, LS tüplerinin kapaklarını teker teker kapatın ve her bir aktarım aşaması için
yeni bir pipet ucu kullanın.
4.3 Aşağıda açıklandığı gibi, zenginleştirilmiş numuneyi LS tüplerine aktarın:
Öncelikle, her bir zenginleştirilmiş numuneyi bağımsız bir LS tüpüne aktarın. Son olarak NC'yi aktarın.
4.4 Bir defada bir strip üzerinde çalışarak, LS tüpü stripinin kapağını sökmek için, 3M™ Moleküler Tayin Kapak Takma/
Kapak Sökme Aracı - Lizis'i kullanın.
4.5 LS tüpü kapağını çıkarın; lizat yeniden test için tutulacaksa, lizis sonrasında yeniden uygulama için kapakları temiz bir
kaba yerleştirin. Elde bulunan lizatın işlenmesi için, Ek A'ya bakın.
4.6 Protokol Tabloları 2, 3 ve 4 aksi belirtilmedikçe, 20 µL'lik numuneyi LS tüpüne aktarın.
5. Ayrı numune striplerinin her biri ilgili LS tüpüne eklenene kadar 4.2 adımını tekrarlayın.
6. Gerektiği şekilde, test edilecek her bir numune için 4.1 ila 4.6 adımlarını tekrarlayın.
7. Tüm numuneler aktarıldığında, 20 µL'lik NC'yi (steril zenginleştirme ortamı, örn. Demi-Fraser Broth) bir LS tüpü içine
yerleştirin. Negatif Kontrol olarak su kullanmayın.
8. 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası sıcaklığının 100 ±1°C'de olduğunu doğrulayın.
9. LS tüplerinin açık rafını 3M Moleküler Tayin Isıtma Bloğu Ek Parçası'na yerleştirin ve 15 ±1 dakika süreyle ısıtın. Isıtma
boyunca, LS solüsyonunun rengi pembeden (soğuk) sarıya (sıcak) dönecektir.
Test lizis aşaması sırasında doğru şekilde ısıl işleme tabi tutulmayan numuneler, olası bir biyolojik tehlike olarak
düşünülebilir ve 3M Moleküler Tayin Cihazı'na KONULMAMALIDIR.
10. Açık LS tüpü rafını ısıtma bloğundan çıkarın ve 3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası'nda en az 5 dakika ve
en fazla 10 dakika boyunca soğutun. 3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası olmaksızın ortam sıcaklığında
kullanılan Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası doğrudan laboratuvar tezgahına oturmalıdır. Soğuduğunda, lizis
solüsyonunun rengi tekrar pembeye dönecektir.
11. LS tüpü rafını 3M Moleküler Tayin Soğutma Bloğu Ek Parçası'ndan çıkarın.
00:15:00
99-101ºC
00:05:00
8
(Türkçe)
TR
20 µl
20-25ºC