3M MDA2LMO96 Mode D'emploi page 46

Nota: a seconda dell'unità riscaldante, attendere circa 30 minuti affinché l'Inserto del blocco di calore per il sistema di
rilevamento molecolare 3M raggiunga la temperatura. Utilizzando un termometro adeguatamente calibrato (ad es., un
termometro a immersione parziale o uno digitale a termocoppia,non un termometro a immersione totale) inserito nella
posizione designata, verificare che l'Inserto del blocco di calore per il sistema di rilevamento molecolare 3M sia a 100 ± 1 °C.
Preparazione dello Strumento per l'analisi molecolare 3M™
1. Avviare il Software per l'analisi molecolare 3M™ ed effettuare l'accesso. Contattare il rappresentante Sicurezza
alimentare 3M per assicurarsi di avere la versione più aggiornata del software.
2. Accendere lo Strumento per l'analisi molecolare 3M.
3. Creare o modificare un'esecuzione con i dati per ciascun campione. Fare riferimento al Manuale per l'utente del Sistema
per l'analisi molecolare 3M per i dettagli.
Nota: lo Strumento per l'analisi molecolare 3M deve raggiungere e mantenere una temperatura di 60 °C prima di
inserire il Vassoio per caricamento rapido per il sistema di rilevamento molecolare 3M con tubi di reazione. Tale fase di
riscaldamento dura 20 minuti circa ed è indicata da una spia ARANCIONE sulla barra di stato dello strumento. Quando lo
strumento è pronto per avviare l'analisi, la barra di stato diventa VERDE.
Lisi
1. Far riscaldare i tubi di soluzione di lisi (LS) lasciando la rastrelliera a temperatura ambiente (20-25 °C) per una notte
(16-18 ore). Le alternative per equilibrare i tubi LS a temperatura ambiente sono: posizionare i tubi LS sul banco di
laboratorio per almeno 2 ore; incubarli in un incubatore a 37 ± 1 °C per 1 ora; oppure posizionarli in un'unità riscaldante a
secco con doppio blocco per 30 secondi a 100 °C.
2. Capovolgere i tubi provvisti di tappo per miscelarli. Passare alla fase successiva entro 4 ore.
3. Rimuovere il brodo di arricchimento dall'incubatore.
4. È necessario un tubo LS per ciascun campione e il Controllo negativo (NC) (mezzo di arricchimento sterile).
4.1 Le strisce di tubi LS possono essere tagliate per ottenere il numero di tubi LS necessario. Selezionare il numero
necessario di strisce di tubi LS singole o da 8 tubi. Posizionare i tubi LS in una rastrelliera vuota.
4.2 Al fine di evitare la contaminazione crociata, stappare una striscia di tubi LS alla volta e utilizzare una nuova punta di
pipetta per ciascuna fase di trasferimento.
4.3 Trasferire il campione arricchito nei tubi LS come descritto di seguito:
Trasferire per primo ciascun campione arricchito in un tubo LS singolo. Trasferire il NC per ultimo.
4.4 Utilizzare lo Strumento di inserimento/rimozione del tappo per il rilevamento molecolare 3M™ - Lisi per rimuovere il
tappo da una striscia di tubi LS, una striscia alla volta.
4.5 Gettare via il tappo del tubo LS; se il lisato viene conservato per effettuare nuovamente il test, posizionare i
tappi in un contenitore pulito per consentirne nuovamente l'applicazione dopo la lisi. Per l'elaborazione del lisato
conservato, consultare l'Appendice A.
4.6 Trasferire 20 µl di campione in un tubo LS, a meno che non venga indicato altrimenti dai protocolli delle
Tabelle 2, 3 o 4.
5. Ripetere il punto 4.2 finché ciascun singolo campione non è stato aggiunto al tubo LS corrispondente nella striscia.
6. Ripetere i punti da 4.1 a 4.6 fin quando è necessario, per il numero di campioni da testare.
7. Una volta trasferiti tutti i campioni, trasferire 20 µl di NC (mezzo di arricchimento sterile, ad es. brodo Demi-Fraser) in un
tubo LS. Non utilizzare l'acqua come NC (Controllo negativo).
8. Verificare che la temperatura dell'Inserto del blocco di calore per il sistema di rilevamento molecolare 3M sia 100 ±1 °C.
9. Posizionare la rastrelliera per tubi LS, scoperta, nell'Inserto del blocco di calore per il sistema di rilevamento molecolare
3M e riscaldare per 15 ±1 minuti. Durante il riscaldamento, la soluzione LS passerà dall'essere di colore rosa (freddo) a
giallo (caldo).
I campioni non correttamente trattati termicamente durante la fase di lisi dell'analisi possono essere considerati un
potenziale rischio biologico e NON dovranno essere inseriti nello Strumento per l'analisi molecolare 3M.
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(Italiano)
IT
20 µl