Leica BIOSYSTEMS BOND Ready-to-Use ISH RNA Negative Control Probe PB0809 Mode D'emploi page 37

• Спесимените преди и след фиксация, както и всички материали, изложени на тяхното влияние, трябва да бъдат третирани
като способни да предадат инфекция и да бъдат изхвърлени, прилагайки съответните предпазни мерки
пипетирайте реагенти с уста и избягвайте контакт на кожата и лигавиците с реагенти или спесимени. При контакт на реагенти
или спесимени с чувствителни зони измийте зоните с обилно количество вода. Потърсете медицинска помощ.
• Консултирайте се с федералните, държавните или местните регламенти относно изхвърлянето на потенциално токсични
компоненти.
• Свеждайте до минимум микробната контаминация на реагентите, в противен случай може да се появи увеличаване на
неспецифичното оцветяване.
• Извличането, инкубационните времена или температури, различни от посочените, могат да доведат до погрешни резултати.
Всякакви подобни промени трябва да бъдат валидирани от потребителя.
Инструкции за употреба
Продуктът RNA Negative Control Probe е разработен за употреба с автоматизираната система BOND (включва система Leica
BOND-MAX и система Leica BOND-III) в комбинация с Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer Refine Detection и спомагателни
реагенти BOND. Препоръчителният протокол за оцветяване за RNA Negative Control Probe е ISH Protocol A. Препоръчва се
извличане на ензими в продължение на 15 минути с помощта на BOND Enzyme Pre-treatment Kit, Enzyme 1.
Винаги трябва да се използват подходящи контроли на тъкани и реагенти. Протоколът за контролите на тъкани и реагенти
трябва да съответства на този за РНК тестова проба.
Качествен контрол
Различията в обработката на тъканите и техническите процедури в лабораторията на потребителя могат да доведат до
значително вариране на резултатите, налагащо редовно извършване на вътрешен контрол в допълнение към следните
процедури.
Позитивна тъканна контрола
Използва се, за да се покажат правилно приготвени тъкани и правилни техники на оцветяване. Една позитивна тъканна
контрола трябва да бъде включена за всеки сет с тестови условия при всяка серия проби за оцветяване.
Тъкан със слабо позитивно оцветяване е по-подходяща от тъкан със силно позитивно оцветяване за оптимален качествен
контрол и за откриване на по-малки нива на деградация на реагента.
Негативна тъканна контрола
Трябва да се изследва след позитивната тъканна контрола, за да се провери специфичността на маркирането на целевия
елемент от сондата. Алтернативно, разнообразието от различни видове клетки, присъстващи в повечето тъканни срези, често
предлага места за негативна контрола, но това трябва да се провери от потребителя.
Негативна контрола на реагента
Използвайте RNA Negative Control Probe PB0809 вместо тестова проба РНК със срез от всеки спесимен на пациента, за да
направите оценка на неспецифичното оцветяване и да дадете по-добра интерпретация на специфичното оцветяване на
прицелния елемент.
Позитивна контрола на реагента
Използвайте RNA Positive Control Probe PB0785 вместо РНК тестовата проба, със срез от всеки спесимен на пациента, за да
предоставите информация за запазването на нуклеиновите киселини в тъканта, както и за достъпността на нуклеиновите
киселини за сондата. Ако RNA Positive Control Probe не показва позитивно оцветяване, резултатите от пробите, включени в
теста, трябва да се считат за невалидни.
Тъкан от пациента
Изследвайте проби на пациенти, оцветени последно с РНК тестова проба. Наситеността на позитивното оцветяване трябва да
бъде оценена в контекста на всяко неспецифично фоново оцветяване на RNA Negative Control Probe PB0809.
Очаквани резултати
Нормални тъкани
При използване на PB0809 не се наблюдава оцветяване при широк набор от тъкани. (Общ брой на оценените нормални случаи
= 96).
Абнормни тъкани
При използване на PB0809 не се наблюдава оцветяване при тумори на яйчниците (0/3), тумори на щитовидната жлеза (0/3),
белодробни тумори (0/3), тумори на черния дроб (0/3), мозъчни тумори (0/2), тумори на хранопровода (0/2), тумори на гърдата
(0/2), кожни тумори (0/2), метастатични тумори (0/2), тумори на стомаха (0/1), тумори на ободното черво (0/1), тумори на
дебелото черво (0/1), тумор на ларинкса (0/1) и тумор на тимуса (0/1) (Общ брой на оценените абнормни случаи = 29).
PB0809 се препоръчва като помощен инструмент за скрининг за оценка на оцветяването на тестова проба РНК на
спесимен от пациент.
Специфични ограничения на продукта
Продуктът RNA Negative Control Probe е оптимизиран от Leica Biosystems за употреба с Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer
Refine Detection и спомагателни реагенти BOND. Потребителите, които се отклоняват от препоръчаните процедури за тестване,
трябва да поемат отговорност за интерпретацията на резултатите на пациентите при тези обстоятелства. Времетраенето на
протоколите може да варира поради вариацията във фиксацията на тъканта и ефективността на ензиматичната асимилация
и трябва да се определи емпирично. Трябва да се използва RNA Negative Control Probe при оптимизиране на условията на
извличане и времетраенето на протоколите.
2
. Никога не
PB0809
Page 36