Leica BIOSYSTEMS BOND Ready-to-Use ISH RNA Negative Control Probe PB0809 Mode D'emploi page 43

• Specimenele, înainte și după fixare, precum și toate materialele expuse la acestea, trebuie manipulate ca și când ar avea potențialul
de a transmite infecții și trebuie eliminate luând măsurile de precauție adecvate
contactul reactivilor și probelor cu pielea și membranele mucoase. Dacă reactivii sau probele vin în contact cu suprafețele sensibile,
spălați cu apă din abundență. Solicitați asistență medicală.
• Consultați reglementările naționale, județene sau locale pentru informații privind eliminarea oricăror componente cu potențial toxic.
• Reduceți la minimum contaminarea microbiană a reactivilor, în caz contrar poate apărea o creștere a colorării nespecifice.
• Timpii sau temperaturile de recuperare, incubare care diferă de valorile specificate pot genera rezultate eronate. Orice astfel de
modificare trebuie validată de către utilizator.
Instrucțiuni de utilizare
RNA Negative Control Probe a fost dezvoltată pentru utilizarea pe sistemul automat BOND (care include sistemul Leica BOND-MAX
și sistemul Leica BOND-III) în combinație cu Anti-Fluorescein Antibody și BOND Polymer Refine Detection. Protocolul de colorație
recomandat pentru RNA Negative Control Probe este ISH Protocol A. Se recomandă pretratarea enzimatică utilizând BOND Enzyme
Pretreatment Kit, Enzyme 1, timp de 15 minute.
Trebuie utilizate întotdeauna țesuturi și reactivi de control corespunzători. Protocolul pentru țesuturile și reactivii de control trebuie să
corespundă cu cel al probei de testare ARN.
Controlul calității
Diferențele în ceea ce privește procesarea țesutului și procedurile tehnice în laboratorul utilizatorului pot cauza o variabilitate
semnificativă a rezultatelor, necesitând efectuarea cu regularitate de controale interne, în plus față de următoarele proceduri.
Țesutul de control pozitiv
Folosit pentru a indica țesuturile pregătite corect și tehnicile de colorare adecvate. O probă de țesut de control pozitiv trebuie să fie
inclusă pentru fiecare set de condiții de testare în fiecare etapă de colorare.
Un țesut cu colorare pozitivă slabă este mai adecvat decât un țesut cu colorare pozitivă puternică în vederea unui control optim al
calității și pentru a detecta nivelurile minore de degradare a reactivului.
Țesutul de control negativ
Trebuie examinat după țesutul de control pozitiv pentru a verifica specificitatea informațiilor etichetării probei față de țintă. Ca alternativă,
varietatea de tipuri diferite de celule prezente în majoritatea secțiunilor tisulare oferă frecvent locuri de control negativ, dar acest lucru
trebuie verificat de către utilizator.
Reactivul de control negativ
Folosiți RNA Negative Control Probe PB0809 în locul probei de testare ARN cu o secțiune din specimenul fiecărui pacient pentru a
evalua colorarea nespecifică și a permite o mai bună interpretare a colorării specifice la țintă.
Reactivul de control pozitiv
Folosiți RNA Positive Control Probe PB0785 în locul probei de testare ADN cu o secțiune din specimenul fiecărui pacient pentru a furniza
informații despre conservarea acizilor nucleici în țesut precum și accesibilitatea acizilor nucleici pentru probă. Dacă RNA Positive Control
Probe nu demonstrează colorația pozitivă, rezultatele obținute cu specimenele testate trebuie considerate nevalide.
Țesutul pacientului
Examinați specimenele pacientului colorate cu proba de testare ADN ultimele. Intensitatea colorării pozitive trebuie evaluată în contextul
oricărei colorații de fundal nespecifice a RNA Negative Control Probe PB0809.
Rezultate așteptate
Țesuturi normale
La utilizarea PB0809 nu s-a observat vreo colorare la o varietate de țesuturi. (Numărul total al cazurilor normale evaluate = 96).
Țesuturi anormale
Using PB0809 nu a fost observată vreo colorare în tumori ovariene (0/3), tumori tiroidiene (0/3), tumori pulmonare (0/3), tumori
hepatice (0/3), tumori cerebrale (0/2), tumori esofagiene (0/2), tumori mamare (0/2), tumori ale pielii (0/2), tumori metastatice de origine
necunoscută (0/2), tumori gastrice (0/1), tumori de colon (0/1), tumori rectale (0/1), o tumoare a laringelui (0/1) și o tumoare a timusului
(0/1) (Număr total de cazuri anormale evaluate = 29).
PB0809 este recomandată pentru a ajuta ca instrument de screening pentru evaluarea colorației unei probe de testare ARN pe
un specimen al pacientului.
Restricții specifice produsului
RNA Negative Control Probe a fost optimizată la Leica Biosystems pentru utilizarea cu Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer
Refine Detection și cu reactivii auxiliari BOND. Utilizatorii care se abat de la procedurile de testare recomandate trebuie să accepte
responsabilitatea pentru interpretarea rezultatelor pacientului în aceste circumstanțe. Timpii protocolului pot varia, datorită variației
în fixarea țesutului și eficacității digestiei enzimatice, și trebuie să fie determinați empiric. Atunci când se optimizează condițiile de
recuperare și timpii protocolului trebuie utilizată RNA Negative Control Probe.
Rezolvarea problemelor
Referința 3 poate ajuta la acțiunile de remediere.
Contactați distribuitorul dumneavoastră local sau biroul regional al Leica Biosystems pentru raportarea colorării neobișnuite.
Informații suplimentare
Informații suplimentare referitoare la hibridizarea in situ cu reactivi BOND, sub titlurile Principiul procedurii, Materiale necesare,
Pregătirea specimenului, Controlul calității, Verificarea analizei, Interpretarea colorării, Explicarea simbolurilor de pe etichete și Limitări
generale pot fi găsite în „Utilizarea Reactivilor BOND" din documentația dumneavoastră de utilizare a sistemului BOND.
2
. Nu pipetați niciodată reactivii cu gura și evitați
PB0809
Page 42