Table des Matières
Publicité
Les langues disponibles
Les langues disponibles
•
Återvinnande och andra inkubationstider eller temperaturer än de specificerade kan ge felaktiga resultat. Sådana förändringar ska
valideras av användaren.
Instruktioner Vid Användning
RNA Negative Control Probe har utvecklats för användning med det automatiska BOND-systemet (som innefattar systemen
Leica BOND-MAX och Leica BOND-III) i kombination med Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer Refine Detection och BOND
hjälpreagenser. Det rekommenderade färgningsprotokollet för RNA Negative Control Probe är ISH Protocol A. Enzymatisk förbehandling
med BOND Enzyme Pretreatment Kit, Enzyme 1 rekommenderas, 15 minuter.
Använd alltid för ändamålet avsedda vävnads- och reagenskontroller. Vävnads- och reagensprotokollen ska överensstämma med
protokollet för RNA-testsonden.
Kvalitetskontroll
Skillnader i vävnadsbehandling och tekniska metoder i användarens laboratorium kan ge stor variation i resultaten; regelbundna
internkontroller är därför nödvändiga utöver metoderna nedan.
Positiv vävnadskontroll
Används för att påvisa korrekt förberedda vävnader och rätt färgningstekniker. En positiv vävnadskontroll per testuppsättning bör ingå
vid varje färgningskörning. En vävnad med svag positiv färgning är bättre lämpad för optimal kvalitetskontroll och för att upptäcka låga
nivåer av reagensdegradering än en vävnad med stark positiv färgning.
Negativ vävnadskontroll
Bör undersökas efter den positiva vävnadskontrollen, för att bekräfta sondmärkningens specificitet gentemot målet. Alternativt ger
ofta den mängd olika celltyper som finns i de flesta vävnadssnitt upphov till negativa kontrollområden, men detta bör kontrolleras av
användaren.
Negativ reagenskontroll
Använd RNA Negative Control Probe PB0809 i stället för RNA-testsonden på en begränsad del av varje patientprov för att utvärdera
icke-specifik färgning och underlätta tolkningen av specifik infärgning av målet.
Positiv reagenskontroll
Använd RNA Positive Control Probe PB0785 i stället för RNA-testsonden på en begränsad del av varje patientprov för information om
bibehållande av nukleinsyror i vävnaden samt sondens tillgång till nukleinsyror. Om RNA Positive Control Probe inte uppvisar positiv
färgning bör resultat erhållna från testproverna anses vara ogiltiga.
Patientvävnad
Undersök patientprover färgade med RNA-testsonden sist. Positiv färgningsintensitet bör utvärderas inom ramen för all ospecifik
bakgrundsfärgning av RNA Negative Control Probe PB0809.
Förväntade Resultat
Normala vävnader
Vid användning av PB0809 observerades ingen färgning i ett stort antal olika testade vävnader. (Totalt antal utvärderade normala fall =
96).
Tumörvävnader
Vid användning av PB0809 observerades ingen färgning i äggstockstumörer (0/3), sköldkörteltumörer (0/3), lungtumörer (0/3),
levertumörer (0/3), hjärntumörer (0/2), esofagustumörer (0/2), brösttumörer (0/2), hudtumörer (0/2), metastatiska tumörer av okänt
ursprung (0/2), magsäckstumörer (0/1), kolontumörer (0/1), rektala tumörer (0/1), en struphuvudtumör (0/1), samt en thymustumör (0/1)
(Totalt antal utvärderade onormala fall = 29).
PB0809 rekommenderas för att underlätta som ett screeningverktyg, för att utvärdera färgning av en RNA-testprob på ett
patientprov.
Produktspecifika Begränsningar
RNA Negative Control Probe har optimerats hos Leica Biosystems för användning med Anti-Fluorescein Antibody, BOND Polymer
Refine Detection och BOND hjälpreagenser. Användare som avviker från rekommenderat testförfarande måste vid ändrade förhållanden
ta ansvar för tolkningen av patientresultaten. Protokolltiderna kan variera på grund av variationer i vävnads fixering och hur effektivt
enzymerna smälter och skall fastställas empiriskt. RNA Negative Control Probe ska användas då förhållanden för återvinnande och
protokolltider ska optimeras.
Felsökning
Referens 3 kan vara till hjälp vid felsökningsåtgärd.
Kontakta en lokal distributör eller Leica Biosystems regionkontor för att rapportera onormal infärgning.
Mer Information
Mer information om in situ-hybridisering med BOND-reagens finns under rubrikerna Bakgrund till metoden, Nödvändig materiel,
Förbereda provet, Kvalitetskontroll, Verifiering av assayer, Tolka infärgningsresultat, Symbolförklaring för etiketter och Allmänna
begränsningar i "Använda BOND-reagens" i BOND användardokumentation.
PB0809
Page 20
Publicité
Table des Matières
