Beoogd Gebruik - Leica BIOSYSTEMS DS9477 Mode D'emploi

ChromoPlex 1 Dual Detection for BOND
Catalog No: DS9477

Beoogd gebruik

Dit detectiesysteem is bedoeld voor in vitro diagnostisch gebruik.
ChromoPlex 1 Dual Detection is een biotine-vrije, polymere mierikswortel peroxidase (HRP)-verbinder en polymere alkaline fosfaat
(AP)-verbinder antilichaam conjugaatsysteem voor de opsporing van weefselgebonden muis en konijn IgG primaire antilichamen. Het
is bedoeld voor het aankleuren van secties van formaline vaste, in paraffine ingebed weefsel op het BOND geautomatiseerde systeem
(waaronder het Leica BOND-MAX-systeem en het Leica BOND-III-systeem).
De klinische interpretatie van elke aankleuring of de afwezigheid daarvan moet aangevuld worden door morfologische studies. De juiste
controlemaatregelen moeten binnen de context van de klinische achtergrond van de patiënt en andere diagnostische tests door een
gekwalificeerde patholoog geëvalueerd worden.
De ChromoPlex 1 Dual Detection moet volgens de voorgeschreven protocollen voor behandeling van weefsels van het laboratorium
gebruikt worden. Ter controle moeten laboratoria elk patiëntmonster aankleuren met positieve, negatieve en andere weefsel-specifieke
benodigde controlemaatregelen.
Samenvatting en uitleg
Immunohistochemische technieken kunnen gebruikt worden ten behoeve van het aantonen van de aanwezigheid van antigenen in
weefsel en cellen (zie: "BOND reagentia gebruiken" in uw BOND gebruikshandleiding).
ChromoPlex 1 Dual Detection maakt gebruik van een nieuw gecontroleerde polymerisatietechnologie om polymerische HRP-verbinder
en AP-verbinder antilichaam conjugaat te maken. Het detectiesysteem vermijdt het gebruik van streptavidine en biotine, en elimineert
daarom niet specifiek aankleuren als resultaat van endogene biotine.
ChromoPlex 1 Dual Detection werkt als volgt:
• Het monster is geïncubeerd met hydrogene peroxide om de endogene peroxidase activiteit te dempen.
• Een door een gebruiker geleverde specifieke primaire muis en konijn antilichaamcocktail wordt toegepast.
• Poly-HRP IgG reagens lokaliseert muis-antilichamen.
• Poly-rAP IgG reagens lokaliseert konijn-antilichamen.
• Het eerste substraat chromogeen, 3,3'-diaminobenizidine tetrahydrochloride hydrateren (DAB), visualiseert muis-antilichamen via
een bruine neerslag.
• Het tweede substraat chromogeen, (Fast Red), visualiseert konijn-antilichamen via een rode neerslag.
• Hematoxyline (blue) tegenkleuring ondersteunt de visualisatie van celkernen.
Door gebruik te maken van ChromoPlex 1 Dual Detection in combinatie met het BOND geautomatiseerde systeem daalt de mogelijkheid
van een menselijke fout en inherente variabiliteit resulterend uit individuele reagens verdunning, handmatig pipetteren en reagens
toepassing.
Geleverde reagentia
De geleverde reagentia zijn afdoende voor 25 individuele BOND aankleuringen, of een maximum aan 100 objectglaasjes.
Voor een maximum van 100 objectglaasjes uit dit detectiesysteem, moeten de objectglaasjes in batches van 4 of groter gemaakt
worden, per set van objectglaasjes met aankleuring. Batches maken van 4 of minder zal resulteren in minder aangekleurde
objectglaasjes.
1. Peroxide Block (15 mL) 3-4% hydrogene peroxide.
2. Polymer mHRP (15 mL) poly-HRP anti-muis bevat 10% (v/v) dierserum in tris gebufferde saline en 0,1%
3. Polymer rAP (15 mL) poly-AP anti-konijn bevat 10% (v/v) dierserum in tris gebufferde saline en 0,09% ProClin™ 950.
4. DAB Part 1 (2 mL) 66 mM 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride hydrateren in een stabilisator oplossing.
5. DAB Part B (35 mL) ≤0.1% (v/v) hydrogene peroxide in een stabilisator oplossing.
6. Red Part A (5.5 mL) activator bevat 0,5% ProClin™ 950.
7. Red Part B (1.0 mL) Substraat.
8. Red Part C (1.0 mL) Substraat.
9. Red Part D (35 mL) buffer oplossing bevat 0,5% ProClin™ 950.
10. Hematoxylin DS9477 (15 mL) <0,1% Hematoxyline.
Verdunning en mixen
ChromoPlex 1 Dual Detection is geoptimaliseerd voor gebruik op het BOND systeem.
Bereiding, mixen, verdunning of titratie van deze reagentia is niet vereist.
Vereiste maar niet geleverde materialen
Insluitmiddelen die compatibel zijn met ChromoPlex 1 Dual Detection (zie de Voorschriften).
Raadpleeg "BOND reagentia gebruiken" in uw BOND gebruikershandleiding voor een complete lijst met materialen, vereist voor
behandelen van monsters en immunohistochemische aankleuring gebruik makend van het BOND systeem.
Opslag en stabiliteit
Opslaan tussen 2–8 °C. Niet invriezen. Niet gebruiken na de houdbaarheidsdatum aangegeven op de label. Direct weer op temperatuur
2–8 °C brengen na gebruik.
Er zijn geen duidelijke signalen die de instabiliteit van dit product aangeven; om die reden moeten er positieve en negatieve controles
tegelijkertijd gedaan worden met onbekende monsters (raadpleeg de "kwaliteitscontrole" in de sectie "BOND reagentia gebruiken" van
uw BOND gebruikershandleiding).
DS9477
Page 26
ProClin™ 950.